一、海藻糖对干燥后单克隆抗体血型试剂的保活作用(论文文献综述)
张璐,伍钢,杜海林[1](2018)在《人源抗M试剂血清的制备和应用》文中进行了进一步梳理目的:利用南京红十字血液中心废弃抗M抗体阳性血浆制备人源抗M试剂血清,达到报废血液再利用的目的。方法:将抗M抗体阳性的血浆通过中和稀释,冻融浓缩,海藻糖-PEG浓缩等一系列方法,制备成人源化的抗M试剂血清。结果:制备的血清抗M效价可提高4倍,与市售试剂血清相比凝集强度有提高,1~2个月后制备的抗体效价基本不变。结论:利用废弃抗M抗体阳性血浆制备的人源抗M试剂血清亲和力在一定程度上高于市售血清,可适当用于日常标本检测,达到废血再利用的目的。
陈肇杰,孙爱农,冯广满,曾桂胜,梁勇明[2](2013)在《血型抗体浓缩技术在溶血性输血反应检测中应用》文中研究说明目的探讨海藻糖-聚乙二醇(PEG)法血型抗体浓缩技术在溶血性输血反应(HTR)检测中应用价值。方法以海藻糖-PEG法血型抗体浓缩技术处理已知抗体特异性血清(抗A、B、D、E、M、N、S)和疑似HTR患者血清,再分别检测血型抗体活性或效价,观察标本中红细胞血型同种抗体在浓缩前后的效价变化。结果经海藻糖-PEG法处理后,IgG型血型抗体效价升高2~4倍,IgM型血型抗体效价升高2~6倍,二者升高倍数比较差异有统计学意义(P<0.01);可有效检出低浓度血型抗体。结论海藻糖-PEG法血型抗体浓缩技术操作简便,可提高血型抗体检测灵敏度。
李小白[3](2013)在《干旱条件下外源CaCl2、海藻糖和甜菜碱对谷子萌发及幼苗生长的影响》文中研究表明本试验以晋谷21号为材料,以18%的PEG-6000(渗透势-0.4Mpa)溶液和含水量为9%的土壤模拟干旱胁迫,通过对谷子种子发芽率、发芽势及芽长、根长、幼苗生长、膜脂过氧化和保护酶活性等指标进行测定分析,研究外源氯化钙、海藻糖和甜菜碱对干旱胁迫下谷子种子萌发及幼苗生理特性的影响,试验结果表明:(1)浓度为10.0mmol/LCaCl2、15.0mmol/L海藻糖及1.5mmol/L甜菜碱处理能够缓解18%的PEG溶液模拟的干旱胁迫对种子萌发的抑制,提高种子发芽率,特别是萌发第5天种子发芽率比对照提高了2%~13%;同时提高种子POD、SOD、CAT活性,从而缓解了由干旱造成的过氧化反应。(2)氯化钙、海藻糖和甜菜碱的复配试剂缓解干旱胁迫下谷子的生长的效果明显好于施用单一试剂。通过施用复配试剂,能够缓解含水量为9%的土壤模拟的干旱胁迫对种子萌发的抑制,使土壤模拟干旱培养下的谷子发芽势增加68.2%,发芽率增加77.4%。(3)复配试剂浸种明显缓解了干旱胁迫下谷子种子萌发受到的抑制作用。显着提高了谷子的种子萌发的含水量和吸水速率,较干旱胁迫下的谷子提高了10.2%和2.26倍。浸种处理显着提高了可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量的增加,加快了淀粉的降解。(4)干旱胁迫下喷施复配试剂,谷子幼苗生长抑制明显得到缓解。复配试剂处理能促进谷子幼苗叶片生物量的积累,提高了干旱胁迫下谷子的发芽势和发芽率,诱导处理前期POD活性的快速上升,提高处理后期SOD的活性;有效的抑制了干旱胁迫下谷子幼苗叶片超氧阴离子和过氧化氢的积累,降低丙二醛含量,保护生物膜结构,加快淀粉的分解,并能显着提高脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白的含量,说明复配试剂处理提高了幼苗叶片的抗氧化能力,减轻了干旱胁迫诱导的膜脂过氧化损伤,改善了干旱胁迫下谷子幼苗的渗透调节,提高了谷子幼苗对干旱胁迫的适应性,从而缓解干旱胁迫对谷子幼苗生长的抑制。因此,复配试剂浸种能有效促进干旱条件下种子萌发,复配试剂的喷施能有效提高谷子幼苗的抗旱能力,为复配制剂在生产中的推广提供理论依据。
赵生美[4](2012)在《垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SpTPS1)的截短修饰》文中提出海藻糖的合成由海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)和海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶(TPP)共同催化完成,海藻糖-6-磷酸合成酶是该反应的限速酶。将大肠杆菌和酵母菌海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)与海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶(TPP)的融合基因,导入烟草、马铃薯、水稻和拟兰芥中获得的转基因植株,耐旱等非生物逆境抗性提高。但是,过量表达大肠杆菌和酵母菌TPS基因的转基因植株生长出现畸形等表型,而过量表达植物内源TPS因的转基因植株却没有出现这些表型。这些现象揭示了植物来源的TPS因相对于大肠杆菌和酵母菌TPS基因而言,在转基因研究中具有更加广阔的运用前景。在蕨类植物中,卷柏科一些旱生种在干旱条件下体内海藻糖含量可高达20%。美国科学家从复活卷柏克隆海藻糖-6-磷酸合成酶基因SlTPS1,并申请专利保护。然而植物来源的TPS基因其蛋白的酶活力比较低,在酵母中表达也只能检测到很少的海藻糖积累。通过序列比对发现植物来源的TPS相对大肠杆菌和酵母菌在其N-端有儿十个氨基酸残基的冗余序列,截去N-端冗余序列能够显着提高TPS的催化活性。本课题组通过同源扩增的方法,从垫状卷柏中克隆出海藻糖-6-磷酸合成酶基因全长序列,命名为SpTPS1,申请获准专利保护。本研究通过对垫状卷柏(Selaginella pulvinata, SpTPS1)、复活卷柏(Selaginellalepidophylla, SlTPS1)、玉米(Maize, ZmTPS1)、拟南芥(Arabidopsis thaliana, AtTPS1)、水稻(Oryzasativa, OsTPSI)、酵母(Saccharomyces cerevisiae, ScTPSl)、小麦(Triticum aestivum, TaTPS1)和大肠杆菌(E coli, OtsA)8个物种TPS基因的氨基酸序列进行比对,发现垫状卷柏SpTPS1基因所编码蛋白的氨基酸序列的N-端有75个氨基酸的冗余序列。因此,我们设计相应引物,采用PCR扩增的方法对其进行截短修饰改造,并构建酵母表达载体,转化酵母TPS1突变体,验证截短后TPS基因生物学功能,比较全长基因序列和截短后基因序列编码TPS的催化活性。研究结果如下:(1)成功克隆了2970bp全长基因(SpTPS1)和截短225bp的修饰基因(SpTPS1Δ);(2)通过酵母异源功能互补实验证明,SpTPS1和SpTPS1Δ基因编码的蛋白都具有海藻糖-6-磷酸合成酶功能;(3)酶活测定显示,截短修饰基因编码蛋白的酶活性是全长基因编码蛋白酶活性的6倍,而热激处理测定细胞体内海藻糖含量,截短修饰的基因细胞内海藻糖含量相对于全长基因提高了8%。用截短修饰后的海藻糖-6-磷酸合成酶基因SpTPS1Δ转化玉米等作物,对干旱等非生物逆境抗性的改良作用可能更为明显。
丁振[5](2007)在《海藻糖合酶高产菌株的选育及酶学特性研究》文中研究表明海藻糖作为一种非特异性的保护剂,它具有对生物大分子和生物体组织非特异性的保护作用,从而在分子生物学、医学、食品工业、化妆品工业、农业等领域有着广阔的应用前景,但由于其制取上的困难限制了它的广泛应用。目前海藻糖有多种制取方法,而酶转化法被认为是一种最有前途的海藻糖生产方法。本研究立足于利用海藻糖合酶酶法合成海藻糖,研究内容包括产海藻糖合酶菌株的选育及其培养特性的研究,海藻糖合酶的提取和纯化、酶学特性的研究,海藻糖的提取等。通过高温、高渗等条件从自然界筛选到一株产海藻糖合酶活性较高的菌株No.62,并以其为出发菌株,通过物理和化学诱变方法,得到一株优良的诱变株P-23-37作为本实验的生产菌株。并对其形态特征及生理、生化特性的研究。通过正交实验及响应面法优化确定了其产酶最佳诱导培养基的组成及培养条件,在此优化条件下对菌株进行培养,所得酶活力为48.82U/g湿菌体,比原始条件下的酶活力(36.75U/g湿菌体)提高了32.93%。海藻糖合酶属于胞内酶,必须将细胞破碎使其释放到发酵液中。本实验确定了脂溶法(甲苯破碎法)为破碎方法,得到最优的破碎处理条件:甲苯浓度2%、破壁温度35℃、料液比1:20和150r/min搅拌条件下反应2.5h。粗酶液经过Sephadex- G75和Sephadex-G200凝胶过滤柱,通过SDS-PAGE电泳验证其纯度,得到两条亚基带,并测定它们的分子量分别为55kDa和50kDa,并对其酶学特性进行了研究。以米氏方程为基础,求得海藻糖合酶的固有参数米氏常数Km为8×10-4mol/L,最大反应速度Vm为3.24×10-5 mol/(L﹒S)。本文还对实验所得的海藻糖粗液进行了分离纯化。将海藻糖粗液进行酸解,使麦芽糖分解成单糖,海藻糖保留率达91.9%;而后采用活性炭柱分离,用去离子水和5%乙醇分级洗脱,可将单糖、麦芽糖和海藻糖分开,然后通过离子交换等步骤提取出海藻糖,其结晶纯度为97.5%。另外,通过旋光仪、傅立叶红外光谱仪等测试手段,最终可以确认海藻糖合成酶将麦芽糖转化α,α-型海藻糖。
陈黎忠,李梅,边广珠,李曦光,刘晓云[6](2002)在《海藻糖对干燥后单克隆抗体血型试剂的保活作用》文中进行了进一步梳理目的 研究海藻糖对单克隆抗体血型试剂在干燥状态下的保活作用 ,探讨最适温度和最佳浓度。方法 采用动态观察方法 ,并计算出单克隆抗体的保活率 (% )。结果 5 6℃下 ,平均保活率为 2 1 9% (96d) ,3 7℃下平均保活率为 71 3 % (3 60d) ,2 5℃平均保活率为 71 3 % (180d) ,显示在 3 7℃范围内 ,海藻糖对单克隆抗体有良好保活作用。结论 海藻糖对单克隆抗体具有保活作用 ,为研制干燥血型鉴定板提供可行的依据
二、海藻糖对干燥后单克隆抗体血型试剂的保活作用(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、海藻糖对干燥后单克隆抗体血型试剂的保活作用(论文提纲范文)
(1)人源抗M试剂血清的制备和应用(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 标本留取 |
1.2 试剂红细胞制备 |
1.3 抗体效价测定 |
1.4 中和稀释A型、B型血浆 |
1.5 冻融法浓缩抗M抗体 |
1.6 抗A、抗B抗体吸收 |
1.7 抗体特异性鉴定 |
1.8 海藻糖-PEG血型抗体浓缩技术提高抗M抗体效价 |
1.9 效果测定 |
2 结果 |
2.1 中和前标本抗A、抗B及抗M效价测定 |
2.2 中和稀释A型、B型浆后效价测定 |
2.3 中和后的血浆及AB型浆冻融后抗M效价 |
2.4 混合血浆吸收抗A及抗B抗体后测其效价 |
2.5 海藻糖-PEG浓缩抗M抗体 |
2.6 效果测定 |
3 讨论 |
(2)血型抗体浓缩技术在溶血性输血反应检测中应用(论文提纲范文)
1 资料与方法 |
1.1 一般资料 |
1.2 仪器与试剂 |
1.3 方法 |
1.4 统计学处理 |
2 结 果 |
3 讨 论 |
(3)干旱条件下外源CaCl2、海藻糖和甜菜碱对谷子萌发及幼苗生长的影响(论文提纲范文)
摘要 |
1 引言 |
1.1 钙与植物的抗旱性 |
1.1.1 钙对干旱胁迫下植物生长状况的影响 |
1.1.2 钙对干旱胁迫下细胞膜及保护酶系统的影响 |
1.1.3 钙对渗透保护和调节物质的影响 |
1.2 海藻糖与植物的抗旱性 |
1.2.1 外源海藻糖对植物的保护作用 |
1.2.2 海藻糖对生物膜的保护作用 |
1.2.3 海藻糖对蛋白质的保护作用 |
1.2.4 对其他生物分子的保护作用 |
1.3 甜菜碱与植物的抗旱性 |
1.3.1 甜菜碱对干旱胁迫下植物细胞的渗透调节作用 |
1.3.2 甜菜碱对干旱胁迫下植物细胞的非渗透调节作用 |
1.3.3 外源甜菜碱的研究及应用 |
1.4 本研究的目的意义 |
2 材料与方法 |
2.1 试验材料 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 试验技术路线 |
2.2.2 材料培养和处理 |
2.2.2.1 萌发期最适浓度筛选 |
2.2.2.2 幼苗期最适浓度、配比筛选 |
2.2.2.3 萌发期抗旱能力鉴定 |
2.2.2.4 幼苗期抗旱能力鉴定 |
2.3 指标测定 |
2.3.1 发芽率及发芽势的测定 |
2.3.2 根长、芽长、根鲜重、芽鲜重的测定 |
2.3.3 生理指标测定 |
2.4 统计分析 |
3 结果与分析 |
3.1 干旱胁迫下CaCl_2、海藻糖、甜菜碱对谷子的影响 |
3.1.1 CaCl_2、海藻糖、甜菜碱对干旱胁迫下谷子萌发的影响 |
3.1.2 CaCl_2、海藻糖、甜菜碱对干旱胁迫下谷子幼苗生长的影响 |
3.1.2.1 CaCl_2对干旱胁迫下谷子幼苗生长的影响 |
3.1.2.2 海藻糖对干旱胁迫下谷子幼苗生长的影响 |
3.1.2.3 甜菜碱对干旱胁迫下谷子幼苗生长的影响 |
3.1.3 CaCl_2、海藻糖、甜菜碱对干旱胁迫下谷子幼苗POD活性的影响 |
3.1.4 CaCl_2、海藻糖、甜菜碱对干旱胁迫下谷子幼苗SOD活性的影响 |
3.1.5 CaCl_2、海藻糖、甜菜碱对干旱胁迫下谷子幼苗CAT活性的影响 |
3.2 干旱胁迫下CaCl_2、海藻糖、甜菜碱复配对谷子的影响 |
3.2.1 干旱胁迫下复配试剂对谷子种子萌发及生长情况的影响 |
3.2.2 干旱胁迫下复配试剂对谷子幼苗SOD和POD的影响 |
3.2.3 干旱胁迫下复配试剂对谷子幼苗MDA和O_2~-含量的影响 |
3.2.4 干旱胁迫下复配试剂对谷子幼苗渗透调节物质的影响 |
3.3 复配试剂对干旱胁迫下的谷子萌发和幼苗生长的影响 |
3.3.1 复配试剂对干旱胁迫下种子萌发过程中渗透调节物质与淀粉含量的影响 |
3.3.2 复配试剂喷施对干旱胁迫下谷子生长幼苗叶片保护酶活性的影响 |
3.3.3 复配试剂喷施对干旱胁迫下谷子生长幼苗叶片中O_2~-产生速率和过氧化氢含量的影响 |
3.3.4 复配试剂喷施对干旱胁迫下谷子幼苗叶片渗透调节物质含量的影响 |
4. 讨论与结论 |
4.1 讨论 |
4.1.1 外源CaCl_2溶液对干旱胁迫下晋谷21号生长指标的影响 |
4.1.2 外源CaCl_2溶液对干旱胁迫下晋谷21号幼苗抗氧化酶系的影响 |
4.1.3 外源海藻糖溶液对干旱胁迫下晋谷21号幼苗非特异性保护作用的影响 |
4.1.4 外源甜菜碱对干旱胁迫条件下晋谷21号幼苗生物大分子物质的影响 |
4.1.5 外源甜菜碱和海藻糖作为一种信号传导对干旱胁迫条件下晋谷21号幼苗的影响 |
4.2 结论 |
参考文献 |
英文符号及中英文对照表 |
Abstract |
致谢 |
(4)垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SpTPS1)的截短修饰(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
1 文献综述 |
1.1 垫状卷柏简介 |
1.2 植物抗旱研究概述 |
1.2.1 植物干旱时生理生化变化 |
1.2.2 抗旱基因的分类 |
1.2.3 常见的抗旱基因简述 |
1.2.3.1 脯氨酸合成酶基因 |
1.2.3.2 甜菜碱合成酶基因 |
1.2.3.3 具有解毒和抗氧化胁迫作用的酶类基因 |
1.2.3.4 抗旱调节基因及转录因子 |
1.3 海藻糖研究概述 |
1.3.1 海藻糖的理化特性 |
1.3.2 海藻糖非特异保护作用 |
1.3.2.1 海藻糖对生物膜脂的保护作用 |
1.3.2.2 海藻糖对蛋白质的保护作用 |
1.3.2.3 海藻糖对放射线引起的DNA损伤的保护作用 |
1.3.3 海藻糖作用分子机理 |
1.3.3.1 “水替代”学说 |
1.3.3.2 “玻璃态”学说 |
1.3.3.3 “优先排阻”假说 |
1.3.4 海藻糖与其他分子的协同作用 |
1.3.5 海藻糖的生物合成途径及其相关基因 |
1.3.5.1 由TPS-TPP催化的合成途径 |
1.3.5.2 由TreY-TreZ催化的合成途径 |
1.3.5.3 由TreS催化的合成途径 |
1.3.5.4 由TSase催化的合成途径 |
1.3.5.5 由TreT催化的合成途径 |
1.3.6 海藻糖的降解途径 |
1.3.7 海藻糖应用前景 |
1.3.7.1 在食品中的应用 |
1.3.7.2 在医药行业中的应用 |
1.3.7.3 在农业方面中的应用 |
1.3.8 海藻糖分子生物学研究进展 |
1.3.8.1 海藻糖合成相关基因的研究进展 |
1.3.8.2 海藻糖合成酶基因遗传转化的研究 |
1.4 蛋白质空间结构分析方法 |
1.4.1 同源建模的方法 |
1.4.2 折叠识别 |
1.4.3 从头预测 |
1.5 本研究的立题依据及主要内容 |
2 材料和方法 |
2.1 SpTPS1生物信息学分析与蛋白空间结构预测 |
2.2 SpTPS1和SpTPS1△的克隆 |
2.2.1 垫状卷柏总RNA提取 |
2.2.2 RNA反转录成cDNA |
2.2.3 SpTPS1和SpTPS1△的扩增 |
2.2.4 目的片段的回收与纯化 |
2.2.5 目的片段与克隆载体的连接 |
2.2.6 感受态细胞的制备 |
2.2.7 质粒DNA的转化 |
2.2.8 重组菌落的PCR鉴定 |
2.2.9 质粒提取 |
2.3 SpTPS1和SpTPS1△的功能验证 |
2.3.1 酵母表达载体载体与酵母菌株 |
2.3.2 主要试剂及配制 |
2.3.3 真核表达载体的构建 |
2.3.3.1 pRS6-SpTPS1表达载体的构建 |
2.3.3.2 pRS6-SpTPS1△表达载体的构建 |
2.3.4 酵母感受态细胞的制备 |
2.3.5 酵母感受态细胞的转化 |
2.3.6 酵母质粒提取 |
2.3.7 酵母质粒PCR检测 |
2.3.8 海藻糖-6-磷酸合成酶功能验证 |
2.4 SpTPS1,SpTPS1△酶活及海藻糖含量的测定 |
2.4.1 TPS酶活测定 |
2.4.1.1 酶活测定的原理 |
2.4.1.2 主要的试剂及混合液的配制 |
2.4.1.3 方法步骤 |
2.4.2 海藻糖含量的测定 |
2.4.2.1 主要试剂及仪器 |
2.4.2.2 样品处理 |
2.4.2.3 HPLC测定海藻糖含量 |
3 结果与分析 |
3.1 基因功能结构及截短改造 |
3.1.1 进化树 |
3.1.2 TPS基因序列 |
3.1.3 蛋白质空间结构 |
3.2 垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因 |
3.2.1 垫状卷柏总RNA |
3.2.2 全长基因及截短修饰基因 |
3.2.3 SpTPS1和SpTPS1△的功能 |
3.2.3.1 酵母表达载体 |
3.2.3.2 酵母转化及功能验证 |
3.3 SpTPS1和SpTPS1△基因酶活及海藻糖含量 |
3.3.1 不同转化子的生长情况 |
3.3.2 酵母细胞中TPS酶活及海藻糖含量 |
4 讨论 |
4.1 SpTPS1基因自身结构对TPS酶活力的影响 |
4.2 TPS热激应答反应 |
4.3 TPS1在能量代谢中的调控作用 |
参考文献 |
致谢 |
攻读学位期间发表学术论文 |
(5)海藻糖合酶高产菌株的选育及酶学特性研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第1章 绪论 |
1.1 引言 |
1.2 海藻糖的生物学特性及其功能 |
1.3 海藻糖生物功能的作用机制 |
1.3.1 “水替代”假说 |
1.3.2 “玻璃态”假说 |
1.3.3 “优先排阻”假说 |
1.3.4 “化学稳态”假说 |
1.4 海藻糖的分析方法 |
1.4.1 纸层析法 |
1.4.2 薄层层析法 |
1.4.3 高效液相色谱法 |
1.4.4 气相色谱法 |
1.4.5 蒽酮比色法 |
1.4.6 酶法 |
1.5 海藻糖的应用研究进展 |
1.5.1 海藻糖对生物制品的保存 |
1.5.2 海藻糖在食品工业上的应用 |
1.6 海藻糖的生产方法及其进展 |
1.6.1 酵母抽提法 |
1.6.2 发酵法 |
1.6.3 酶合成法 |
1.6.4 基因重组法 |
1.7 酶法合成海藻糖的现状 |
1.8 论文选题的背景、意义及思路 |
1.8.1 选题的背景和意义 |
1.8.2 主要研究内容 |
第2章 海藻糖合酶高产菌株的选育 |
2.1 引言 |
2.2 实验材料与仪器 |
2.2.1 材料 |
2.2.2 培养基 |
2.2.3 试剂的配制 |
2.2.4 主要仪器设备 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 菌株筛选 |
2.3.2 菌株诱变选育 |
2.3.3 测定方法 |
2.3.4 通过海藻糖合酶以麦芽糖为底物合成海藻糖途径的初步验证 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 菌株的筛选 |
2.4.2 菌株代谢产酶试验(初筛) |
2.4.3 菌株代谢产酶试验(复筛) |
2.4.4 海藻糖合酶高产菌株突变株P-23-37 选育谱系 |
2.4.5 通过海藻糖合酶以麦芽糖为底物合成海藻糖途径的初步验证 |
2.5 本章小结 |
第3章 菌株P-23-37 产酶工艺条件的优化 |
3.1 引言 |
3.2 实验材料与仪器 |
3.2.1 主要材料 |
3.2.2 主要仪器 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 P-23-37 形态特征观察 |
3.3.2 碳源利用情况 |
3.3.3 氮源利用情况 |
3.3.4 诱导培养基的设计 |
3.3.5 影响P-23-37 生长相关因素 |
3.3.6 响应面分析方法优化培养条件 |
3.3.7 P-23-37 生长曲线的测定 |
3.3.8 酶活力的测定 |
3.3.9 P-23-37 斜面保藏实验 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 P-23-37 细胞菌落形态 |
3.4.2 P-23-37 的生理生化试验结果 |
3.4.3 最佳诱导培养基的设计 |
3.4.4 单因素培养条件对菌体生长及酶合成的影响 |
3.4.5 培养工艺参数的响应面分析 |
3.4.6 P-23-37 生长曲线的测定 |
3.4.7 P-23-37 斜面保藏实验 |
3.5 本章小结 |
第4章 海藻糖合酶的提取纯化及酶学特性研究 |
4.1 引言 |
4.2 实验材料与仪器 |
4.2.1 材料 |
4.2.2 主要仪器 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 P-23-37 细胞破壁的研究 |
4.3.2 海藻糖合酶的提取与纯化 |
4.3.3 蛋白质纯度的鉴定 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 P-23-37 细胞破壁的研究 |
4.4.2 盐析法对粗酶的初步纯化 |
4.4.3 Sephadex-G75 凝胶过滤层析柱对海藻糖合酶的分离纯化 |
4.4.4 Sephadex-G200 凝胶过滤层析柱对海藻糖合酶的分离纯化 |
4.4.5 SDS 聚丙烯酰胺电泳所得图谱 |
4.4.6 海藻糖合酶酶学特性的研究 |
4.4.7 海藻糖合酶固有参数的求解 |
4.5 本章小结 |
第5章 海藻糖合酶产物的定性测定 |
5.1 引言 |
5.2 实验材料与仪器 |
5.2.1 海藻糖粗液 |
5.2.2 主要试剂 |
5.2.3 主要仪器 |
5.3 实验方法 |
5.3.1 海藻糖成品性质的测定方法 |
5.3.2 分离纯化 |
5.3.3 产品鉴定 |
5.4 结果与讨论 |
5.4.1 反应液的处理 |
5.4.2 活性炭处理 |
5.4.3 离子交换脱色脱盐 |
5.4.4 结晶 |
5.4.5 产品鉴定 |
5.5 本章小结 |
第6章 总结与展望 |
6.1 总结 |
6.2 本论文的创新点 |
6.3 展望 |
参考文献 |
致谢 |
攻读硕士期间发表的论文 |
四、海藻糖对干燥后单克隆抗体血型试剂的保活作用(论文参考文献)
- [1]人源抗M试剂血清的制备和应用[J]. 张璐,伍钢,杜海林. 临床血液学杂志, 2018(12)
- [2]血型抗体浓缩技术在溶血性输血反应检测中应用[J]. 陈肇杰,孙爱农,冯广满,曾桂胜,梁勇明. 检验医学与临床, 2013(12)
- [3]干旱条件下外源CaCl2、海藻糖和甜菜碱对谷子萌发及幼苗生长的影响[D]. 李小白. 山西农业大学, 2013(03)
- [4]垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SpTPS1)的截短修饰[D]. 赵生美. 四川农业大学, 2012(05)
- [5]海藻糖合酶高产菌株的选育及酶学特性研究[D]. 丁振. 山东轻工业学院, 2007(01)
- [6]海藻糖对干燥后单克隆抗体血型试剂的保活作用[J]. 陈黎忠,李梅,边广珠,李曦光,刘晓云. 临床检验杂志, 2002(06)