一、鬼臼乙叉甙对SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅴ后粘附相关分子表达的影响（论文文献综述）
江建海[1]（2006）在《β1，4半乳糖基转移酶Ⅰ和Ⅴ在肿瘤中作用和转录调控的研究》文中研究表明β1，4半乳糖基转移酶Ⅰ和Ⅴ在肿瘤中作用和转录调控的研究蛋白的糖基化修饰，和肿瘤的发生、生长、迁移和侵袭密切相关。蛋白质的糖基化修饰是在内质网—高尔基体内由糖基转移酶参与下完成的。β1，4—半乳糖基转移酶（β1，4—galactosyltransferase） （简称β1，4GT），能定位于高尔基体催化Galβ1→4GlcNAC糖苷键形成，参与糖复合物的合成。该家族包括β1，4GTⅠ到β1，4GTⅦ共7个成员。β1，4GTⅠ既能定位于高尔基体催化Galβ1→4GlcNAC糖苷键形成，参与糖复合物的合成；又能定位于细胞表面，作为一种细胞粘附分子参与细胞与基质之间和细胞与细胞之间的相互作用。我们的研究发现，β1，4GTⅠ在高侵袭的肺癌细胞PGBE1相对于低侵袭的肺癌细胞PGLH7中高表达。用RNAi抑制其表达或失活型突变体干扰其功能可抑制其在laminin上的黏附，体外的侵袭能力以及FAK的磷酸化活力。转录因子ElAF是肺癌侵袭相关蛋白和EGFR／Ras／ERK信号通路的下游蛋白。报道基因和凝胶阻滞试验证实β1，4GTⅠ是肿瘤侵袭相关转录因子ElAF的靶基因，并受EGFR／Ras／ERK信号通路。过表达ElAF促进β1，4GTⅠ的表达和肺癌侵袭。β1，4GTⅠ在肝癌组织、肝癌细胞中高表达。肝癌病人肝癌切除后，血清中的Galβ1→4GlcNAC修饰明显减少。β1，4GTⅠ的表达受肝癌相关因素黄曲霉素、佛波酯、乙肝病毒HBX蛋白和p53蛋白调控。提示β1，4GTⅠ的表达和活力可作为肝癌发生、发展的临床检测指标。抑制β1，4GTⅠ的表达抑制肝癌细胞的迁移侵袭以及在裸鼠体内的成瘤能力和抑制细胞周期密切相关的D型Cyclin蛋白的表达。过表达β1，4GTⅠ可促进肝癌细胞的迁移侵袭以及在裸鼠体内的成瘤能力和侵袭相关的Integrinβ1的表达和FAK的活性并依赖于其半乳糖基化功能。报道基因和凝胶阻滞试验证实E2F1调控β1，4GTⅠ转录并介导肝癌相关因素黄曲霉素、佛波酯、乙肝病毒HBX和p53蛋白对β1，4GTⅠ的转录调控。β1，4GTⅤ负责合成胶质瘤特征的N—连接型糖链术端GlcNAcβ1，6Man的半乳糖基化修饰。国外研究发现，β1，4GTⅤ在多种肿瘤细胞中受Sp1调控。我们的研究发现，β1，4GTⅤ在胶质瘤表达增高并和胶质瘤的分型相关。过表达β1，4GTⅤ可促进胶质瘤细胞和转化星型胶质细胞的侵袭和生存。抑制其表达可促进凋亡、抑制迁移侵袭以及在裸鼠体内的成瘤能力和抑制AKT的磷酸化活性。另外，其启动子活性可被生长因子EGF，激活型Ras，ERK1，JNK1和激活型AKT激活。鬼臼乙叉甙（VP16），是植物产物鬼臼毒素的一种半合成派生物，它可以对许多人类新生物产生临床作用，用于小细胞肺癌、恶性淋巴癌、卵巢癌、睾丸肿瘤、胃癌)和胶质瘤的治疗。抑制β1，4GTⅤ的表7达促进VP16诱导的胶质瘤细胞凋亡。过表达β1，4GTⅤ抑制VP16诱导的胶质瘤细胞凋亡。VP16可通过抑制Sp1的表达下调β1，4GTⅤ的表达和转录。从上可见，β1，4GTⅤ可促进胶质瘤的发生发展并且可能可作为胶质瘤治疗的新靶向。β1，4GTⅤ在胶质瘤组织、细胞高表达并受EGF／Ras／ERK信号通路调控。我们的研究证实ElAF调控β1，4GTⅤ在胶质瘤细胞中的转录和介导EGF／Ras／ERK信号通路对β1，4GTⅤ的转录调控。过表达ElAF促进β1，4GTⅤ的转录和表达和胶质瘤细胞的侵袭。抑制ElAF的表达抑制胶质瘤细胞的侵袭和EGF促胶质瘤细胞侵袭作用。ElAF调控β1，4GTⅤ的转录是通过和Sp1相互作用后，共同结合到β1，4GTⅤ启动子的Sp1的结合位点。综上所述，β1，4-半乳糖基转移酶（β1，4 galactosyltransferase）对于多细胞生物是不可或缺的糖基转移酶。它们通过改变蛋白质糖链的结构，进而调控包括增殖、分化、发育等多种生理过程和肿瘤发生、肿瘤转移、细胞凋亡等生理过程。但β1，4一半乳糖基转移酶的靶蛋白还不清楚。我们在将来的工作中将采用蛋白组学的方法研究β1，4—半乳糖基转移酶的靶蛋白。
严美娟,沈爱国,程纯,邵晓轶,李爱红,顾建新[2]（2005）在《鬼臼乙叉甙对星形胶质细胞瘤表达β1,4-半乳糖基转移酶的影响》文中认为目的 研究鬼臼乙叉甙（Etoposide ,又称VP16）影响人星形胶质细胞瘤SHG 44细胞周期过程中,与N 糖链合成有关的β1,4 半乳糖基转移酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ（β- 1,4 -galactosyltransferaseⅠ、Ⅱ、Ⅴ,β- 1,4- GalT- Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ）表达变化。方法 首先应用流式细胞仪技术分析VP16处理SHG 44细胞过程中细胞增殖情况的变化,再采用NorthernBlot方法分析处理过程中的SHG 44细胞中β- 1,4 -GalT- Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ的表达变化。结果 流式细胞仪检测表明,细胞培养基加入12 0 μmol/LVP161～6h后能引起SHG 44细胞的S期阻滞。NorthernBlot显示,VP16作用1～6h过程中,β- 1,4 GalT -Ⅰ、Ⅴ表达无显着变化。而β- 1,4- GalT -Ⅱ表达在此过程中则有升高趋势。结论 VP16能够引起星形胶质细胞瘤细胞SHG 44细胞周期改变过程中,β- 1,4 -GalT- Ⅰ、Ⅴ的表达无变化,而β- 1,4 -GalT- Ⅱ的表达明显升高。提示VP16引起肿瘤细胞周期改变,可能通过影响β- 1,4- GalT- Ⅱ的表达,引起有关蛋白质的糖基修饰而实现的。
程纯,严美娟,沈爱国,张冬梅,邵晓轶,王惠民,顾建新[3]（2004）在《鬼臼乙叉甙对SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅴ后粘附相关分子表达的影响》文中认为目的 研究人脑星形胶质细胞瘤SHG 4 4细胞表达 (β 1,4 半乳糖基转移酶Ⅴ （beta 1,4 galactosyltransferaseⅤ ,β 1,4 GalTⅤ ）后对化疗药物敏感性的影响 ,分析鬼臼乙叉甙 （VP16 ）处理表达 β 1,4 半乳糖基转移酶Ⅴ的SHG 4 4细胞后其细胞粘附作用相关因子水平的变化。方法 用 12 0 μmol/L的VP16处理转染了正义、反义 β 1,4 GalTⅤ和空载体的SHG 4 4细胞 2 4h后 ,采用westernblot检测整合蛋白 β1表达变化及局部粘着斑激酶 （focaladhesionkinase,FAK）的蛋白水平和FAK的酪氨酸磷酸化水平。结果 在未经VP16处理的 3株SHG 4 4细胞中 ,FAK的蛋白水平没有明显改变 ,而整合蛋白 β1的蛋白表达在转正义 β 1,4 GalTⅤ的细胞中最高 ;经VP16处理后 ,SHG 4 4细胞中整合蛋白β1的表达水平增高 ,FAK及其磷酸化水平下降。但整合蛋白β1,FAK及其磷酸化水平随细胞中 β 1,4 GalTⅤ表达水平不同而变化。 结论 VP16处理对表达不同水平的β 1,4 GalT Ⅴ的SHG 4 4胶质瘤细胞的粘附影响有所不同 ,提示胶质瘤表达 β 1,4 GalTⅤ不仅与肿瘤的恶性行为有关 ,而且与肿瘤的化疗敏感性有关。
程纯,严美娟,沈爱国,张冬梅,邵晓轶,顾建新[4]（2004）在《SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,4-半乳糖基转移酶V后对鬼臼乙叉甙敏感性影响》文中研究说明目的:研究鬼臼乙叉甙（Etoposide,VP16）对表达β-1,4-半乳糖基转移酶V（beta-1,4-galactosyltransferaseV,β-1,4-GalTV）的SHG-44胶质瘤细胞死亡和凋亡的影响,为进一步探讨β-1,4-GalTV与化疗药物敏感性的关系奠定基础。方法:通过流式细胞仪（FCM）和Hoechst33258染色法,分析不同浓度的VP16处理转染了正义（GalTV-HA/SHG-44）、反义β-1,4-GalTV（GalTV-AS/SHG-44）和空载体（Mock）的SHG-44细胞后细胞的凋亡和死亡情况。结果:①低浓度的VP16（20μmoL/L）处理24h后,GalTV-HA/SHG-44组的死亡细胞加上凋亡细胞的比例明显低于Mock组（t=4.5506,P<0.01）和GalTV-AS/SHG-44组（t=5.0865,P<0.001）。GalTV-AS/SHG-44组的死亡细胞加上凋亡细胞比例明显高于Mock组（t=3.2873,P<0.01）。高浓度的VP16（120μmoL/L）处理48h和72h后,GalTV-HA/SHG-44组死细胞所占比例明显低于Mock组t=3.3664,（P<0.05;t=5.4953,P<0.01）和GalTV-AS/SHG-44组（t=3.1732,P<0.01;t=4.6035,P<0.001）。②MTT分析显示,VP16处理48,72h后,GalTV-HA/SHG-44组活细胞数明显高于Mock组（t=5.0783,P<0.05;t=3.8923,P<0.01）和GalTV-AS/SHG-44组（t=4.5667,P<0.01;t=4.7849,P<0.001）。③VP16（20μmoL/L）处理24h后,用Hoechst33258染色。镜下观察到死亡或者凋亡细胞中的细胞核
二、鬼臼乙叉甙对SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅴ后粘附相关分子表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、鬼臼乙叉甙对SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅴ后粘附相关分子表达的影响（论文提纲范文）
（1）β1，4半乳糖基转移酶Ⅰ和Ⅴ在肿瘤中作用和转录调控的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 β1,4—半乳糖基转移酶Ⅰ在肺癌细胞的作用及转录调控研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 β1,4—半乳糖基转移酶Ⅰ促进肝癌的发生 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 β1,4—半乳糖基转移酶Ⅴ促进胶质瘤的发生发展 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 β1,4—半乳糖基转移酶Ⅴ在抗肿瘤药物鬼臼乙叉甙诱导胶质瘤细胞凋亡中的作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五部分 β1,4-半乳糖基酶Ⅴ在胶质瘤的转录调控研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 后记 |
| 发表论文 |
| 获得奖励 |
| 致谢 |
（2）鬼臼乙叉甙对星形胶质细胞瘤表达β1,4-半乳糖基转移酶的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 人脑胶质细胞瘤SHG-44细胞 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 SHG-44细胞培养及VP16的加入 |
| 1.2.2 流式细胞仪检测VP16对SHG-44细胞周期的影响 |
| 1.2.3 Northern Blot分析β-1, 4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ表达变化 |
| 1.2.3.1 β-1, 4-GalT-Ⅰ、Ⅱ和V探针片段的获取 |
| 1.2.3.2 Northern Blot的探针标记 |
| 1.2.3.3 Northern Blot分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 VP16对SHG-44细胞周期的影响 |
| 2.2 VP16对β-1, 4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ mRNA表达的影响 |
| 3 讨论 |
四、鬼臼乙叉甙对SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅴ后粘附相关分子表达的影响（论文参考文献）
- [1]β1，4半乳糖基转移酶Ⅰ和Ⅴ在肿瘤中作用和转录调控的研究[D]. 江建海. 复旦大学, 2006(02)
- [2]鬼臼乙叉甙对星形胶质细胞瘤表达β1,4-半乳糖基转移酶的影响[J]. 严美娟,沈爱国,程纯,邵晓轶,李爱红,顾建新. 实用癌症杂志, 2005(01)
- [3]鬼臼乙叉甙对SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅴ后粘附相关分子表达的影响[J]. 程纯,严美娟,沈爱国,张冬梅,邵晓轶,王惠民,顾建新. 临床检验杂志, 2004(06)
- [4]SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,4-半乳糖基转移酶V后对鬼臼乙叉甙敏感性影响[J]. 程纯,严美娟,沈爱国,张冬梅,邵晓轶,顾建新. 中国临床康复, 2004(26)