一、顺铂对耳蜗毒性的实验研究（论文文献综述）
胡鹏刚,田克勇,毛小波,王人凤,查定军[1]（2021）在《顺铂耳毒性大鼠耳聋模型的研究》文中认为目的:探讨顺铂对大鼠造成的听力损伤及耳蜗细胞形态学变化。方法:体内实验,运用顺铂腹腔注射的方法,连续七天注射,通过听性脑干反应检测,观察顺铂对不同日龄的大鼠听力损伤情况;测听后取耳蜗,通过基底膜铺片和冰冻切片的免疫荧光染色,观察听力损伤后对耳蜗毛细胞和螺旋神经元的影响。体外实验,耳蜗器官培养免疫荧光染色,观察顺铂对耳蜗毛细胞和螺旋神经元的影响。结果:顺铂具有耳毒性,会对大鼠听力造成损伤,高频听力损伤更加严重,而且对不同日龄的大鼠造成的听力损失不同,小日龄的大鼠对顺铂耳毒性更加敏感。体内实验,顺铂耳毒性造成听力损失,会引起大鼠耳蜗毛细胞的缺失,但未观察到明显的螺旋神经元缺失,也没有观察到明显的Cleaved caspase-3阳性螺旋神经元细胞。体外实验,可以观察到顺铂同时引起毛细胞和螺旋神经元产生明显的损伤。结论:体、内外实验,都可以建立稳定的顺铂耳毒性大鼠耳聋模型,对研究顺铂损伤耳蜗毛细胞的发生机制和保护奠定了实验基础。
叶瑞琴[2]（2021）在《地塞米松-丹酚酸B缀合物及其自递送系统对顺铂致聋的防治作用研究》文中研究说明顺铂（cisplatin,CDDP）是一种广泛应用的化疗药物,但其会造成严重的耳毒性。CDDP引起的耳毒性通常表现为不可逆的、进行性的双侧感音神经性听力损失,严重影响了患者的沟通能力和生活质量。暂无推荐的方案或FDA批准的药物用于防治CDDP诱导的耳毒性,因此亟需寻找有效的防治药物。地塞米松（dexamethasone,DEX）可特异性地结合到耳蜗内的糖皮质激素受体,被广泛用作治疗内耳疾病;然而,其需要高剂量且频繁给药才能达到治疗CDDP诱发听力损失的预期效果,这会造成严重的副作用;另外,DEX的低水溶性也限制了其临床应用。丹参水溶性提取物中的主要活性成分丹酚酸B（salvianolic acid B,SAL）具有多种生物活性,SAL通过抑制活性氧的产生和线粒体凋亡途径,对氨基糖苷类抗生素或CDDP所致耳毒性具有防治作用;SAL水溶性强,给药方便;但生物膜渗透性差,生物利用度极低。本课题组前期以亲水性药物SAL和疏水性药物DEX为原料,通过酯键或酰胺键合成了两亲性缀合物。本文在此基础上,对其稳定性、组装成纳米自递送系统的制备和表征、防治顺铂耳毒性作用、生物相容性等进行研究。首先参照课题组前期的条件,对缀合物进行了合成与表征,同时考察其在人工外淋巴液和磷酸盐缓冲液中的稳定性;高分辨质谱的结果表明成功合成了缀合物及其各个中间体,且缀合物在人工外淋巴液和磷酸盐缓冲液中均能较稳定存在,表明缀合物具有较好的稳定性。两亲性DEX-SAL缀合物通过溶剂挥发法能自组装形成纳米自递送系统,并考察其粒径和稳定性、体外药物释放和通过负载香豆素-6考察纳米粒的体外细胞摄取情况。结果显示纳米自递送系统粒径分布均匀和具有良好的稳定性;体外释放规律考察发现纳米自递送系统的药物释放行为较一致且具有一定缓释作用;自递送系统组在HEI-OC1细胞的荧光强度明显高于游离香豆素-6组,表明自递送系统能够被细胞有效摄取。为了考察缀合物及其自递送系统是否具有防治顺铂耳毒性的作用,本课题建立了顺铂所致斑马鱼毛细胞损伤模型。结果显示,在斑马鱼模型中,与相同浓度的DEX、SAL及其物理混合物相比,缀合物和自递送系统对顺铂诱导的耳毒性具有良好的拮抗作用。同时,还进一步考察了缀合物顺反异构单体对豚鼠顺铂造模的预防作用;结果表明,顺反异构单体均能保护豚鼠内耳毛细胞拮抗顺铂的耳毒性作用,对顺铂致聋具有良好的预防作用。鉴于缀合物及其自递送系统良好的抗耳毒性效果,进一步通过免疫组化法考察缀合物和纳米粒与豚鼠内耳组织的糖皮质激素受体的相互作用,探究其可能的作用机制。研究发现,缀合物及其自递送系统能与耳蜗糖皮质激素受体结合,在不影响结合亲和力和受体活化的前提下促进受体的表达。同时,采用高效液相色谱法测定耳蜗外淋巴液中药物浓度,表明缀合物和纳米粒可以到达耳蜗组织。因此推测缀合物和自递送系统可能通过靶向激活受体,影响细胞核内特定DNA序列发挥药理作用,从而恢复耳蜗的损伤。此外,采用MTT法考察缀合物及其自递送系统对顺铂抗癌活性的影响;结果显示,缀合物和其自递送系统能显着增强顺铂对肝癌Hep G2细胞、乳腺癌MCF-7细胞和肺腺癌A549细胞的活性,起到预防顺铂耳毒性的作用的同时,还能提高顺铂的抗癌作用。最后,通过斑马鱼的胚胎毒性实验、豚鼠的听功能检测和耳蜗组织学评估缀合物及其自递送系统的安全性。结果表明,与正常对照组相比,缀合物和纳米粒组在存活率、孵化率、畸形率、体长及毛细胞平均荧光面积方面均无显着性差异。另外经鼓室注射后缀合物和纳米粒后,豚鼠在所测频率范围内听力阈值均正常,所有实验组的耳蜗组织均未观察到炎症反应,且无其它不良反应,表明了缀合物和纳米粒具有良好的生物安全性。综上所述,设计合成的两亲性的DEX-SAL缀合物及纳米自递送系统,克服了母体药物性质上的缺陷,能发挥两种药物的协同效应,增强了疗效,生物相容性良好,为顺铂药源性聋防治提供一种新的药物及剂型,为抗耳聋药物的研发提供了一种新思路。
冷辉,张琦,孙海波[3]（2020）在《从“瘀毒伤络”理论探讨顺铂致药物性耳聋机制》文中进行了进一步梳理顺铂具有抗肿瘤活性,但其耳毒性可对耳蜗产生不可逆损伤造成药物性耳聋,属于中医"毒聋"范畴。其病因为瘀、毒,由毒致瘀、由瘀致瘀、由瘀致毒,如环无端,由微及渐,形成恶性循环。病机为瘀毒伤络,治则为行气解毒、化瘀通络。川芎嗪为治疗"毒聋"之要药,本文将基于"瘀毒伤络"理论详细论述顺铂致药物性耳聋的中医病因病机,并依据实验研究论述川芎嗪干预顺铂致药物性耳聋的有效性及机制,从中西医结合角度为川芎嗪干预顺铂致药物性耳聋提供理论依据。
闫潇,邓毅,马骏,李鹏杰,杨志军,杨秀娟,周燕[4]（2021）在《顺铂毒性损伤机制及中药防治机制的研究进展》文中研究表明顺铂作为临床常用的广谱抗肿瘤药物之一,用于治疗睾丸癌、卵巢癌、头颈癌、膀胱癌、肺癌、宫颈癌等多种实体癌,疗效显着但毒副作用较强,易对机体产生极大的损害,毒性反应可涉及不同脏器造成严重的损伤,诱导机体出现肾损伤、肝损伤、耳损伤、心脏损伤、神经损伤及其他损伤等。动物实验研究发现,顺铂诱导的损伤是由多种因素共同参与的结果,呈时间、剂量依赖性。而在临床使用过程中,顺铂的治疗剂量也因损伤作用受到极大限制,严重影响患者的生存质量。因此,寻找合适的治疗方案或药物与顺铂联合用药实现减毒增效成为目前研究的主要方向。随着中医药在临床参与度的逐渐增加,中医药在治疗疾病方面显示出其特有的优势,可通过改善机体氧化应激状态、抑制正常细胞凋亡及炎症损伤、激活细胞自噬、调节药物转运蛋白的异常表达等途径有效降低顺铂化疗引起的毒性反应,协同顺铂提高化疗疗效。该文通过对顺铂引起机体各脏器的损伤机制及中药防治顺铂损伤的机制2个方面进行详细的概述,其中包括顺铂诱导不同脏器的损伤剂量与机制,中药与顺铂联合应用降低损伤的有效治疗剂量、联合用药方式、防治机制等,以期为中药联合顺铂等化疗药物增效减毒的合理应用及临床用药提供依据。
刘天乙[5]（2020）在《抑制糖原合成酶激酶3β活性通过调节自噬拮抗顺铂耳毒性》文中进行了进一步梳理第一部分糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）抑制剂氯化锂（LiCl）减轻顺铂致大鼠耳中毒性聋目的:建立顺铂耳中毒性聋大鼠模型,探究GSK-3β抑制剂LiCl对顺铂耳中毒性聋的拮抗作用及外毛细胞中自噬的变化。方法:选用200-220g雄性SD大鼠并随机分为对照组、顺铂组、LiCl组及顺铂+LiCl组。顺铂组于实验的第1-3日给予顺铂4.6mg/kg/d腹腔注射;顺铂+LiCl组在顺铂给药的基础上每日给与LiCl 100mg/kg。于实验开始前及末次顺铂给药后72小时分别检测听性脑干反应（ABR）。通过基底膜铺片行外毛细胞计数比较组间外毛细胞存活率的差异。应用免疫荧光法比较组间耳蜗外毛细胞中糖原合成酶激酶3β及自噬相关蛋白（LC3-Ⅱ和P62）的表达差异。结果:1.顺铂组大鼠ABR反应阈明显高于对照组,而外毛细胞存活数量与对照组相比显着降低。LiCl的预处理减轻了顺铂对大鼠的上述耳毒性效应（各结果P值均<0.05）。2.与对照组相比,顺铂组大鼠耳蜗外毛细胞中磷酸化形式的GSK-3β（GSK-3β-Ser9）的表达水平及自噬水平均增高,而顺铂+LiCl组中该现象则较顺铂组更为明显。结论:1.GSK-3β抑制剂LiCl可以减轻顺铂致大鼠ABR反应阈的升高,提高顺铂作用下大鼠耳蜗外毛细胞的存活率,同时增强外毛细胞中的自噬。2.GSK-3β及其相关自噬可能参与了LiCl对大鼠顺铂耳中毒性聋的拮抗作用。第二部分细胞自噬在抑制GSK-3β拮抗顺铂致听毛细胞的损伤中作用目的:选用HEI-OC1细胞株建立顺铂耳毒性的体外模型,并在上述实验模型中下调GSK-3β表达,并反向调节自噬,探讨自噬在抑制GSK-3β拮抗顺铂致听毛细胞的损伤中的作用。方法:选用HEI-OC1听毛细胞样细胞株（HEI-OC1 WT）,并以负载有GSK-3β沉默序列的腺病毒转染建立稳定敲除GSK3β的HEI-OC1细胞（HEI-OC1 GSK3β-KO）。应用上述两种细胞并分为对照组、顺铂组、顺铂+LiCl组、GSK3β-KO组、顺铂+GSK3β-KO组、顺铂+GSK3β-KO+3-MA组。CCK-8法检测各组细胞存活率的差异,流式细胞术检测组间凋亡比例差异,透射电镜观察组间细胞线粒体形态及自噬小体数量的差异,western blot法检测组间自噬及凋亡相关蛋白（LC3-Ⅱ、P62、bcl-2及bax）表达差异。结果:1.与动物实验中的效应类似,应用GSK3β抑制剂LiCl可提高顺铂作用下HEI-OC1细胞的存活率,降低凋亡比例及凋亡蛋白表达水平,增强自噬蛋白的表达及自噬小体的数量,减少细胞中肿胀空泡化线粒体的数量。2.在HEI-OC1细胞中敲除GSK-3β与应用GSK3β抑制剂LiCl具有类似的细胞保护作用;3.加用自噬抑制剂3-MA后,敲除GSK-3β与应用GSK3β抑制剂LiCl所带来的上述细胞保护作用消失。结论:1.抑制GSK-3β可以减轻顺铂致听毛细胞株HEI-OC1损伤。2.顺铂作用下,抑制GSK-3β所产生的上述细胞保护作用可能是通过诱导保护性自噬减轻线粒体损伤产生的。
田克勇[6]（2019）在《DHCR24在大鼠耳蜗中的表达及作用机制研究》文中研究说明世界卫生组织统计超过3.6亿人饱受耳聋的影响,给个人生活和社会都造成了严重的负担。感音神经性聋是耳科的常见病、多发病,毛细胞和螺旋神经元损失是引起感音神经性聋的主要原因,其损伤后难以再生,导致永久性听力损失。如何保护毛细胞或螺旋神经元免受损伤,充分了解其损伤机制进行保护干预具有重要的研究意义。第一部分基底膜培养药物损伤模型的建立目的基底膜体外培养,建立耳毒性药物损伤基底膜毛细胞或螺旋神经元模型,以便于进行药物性聋机制的研究。方法1.取P0、P1、P2和P3大鼠仔鼠基底膜进行体外培养,随机分为正常对照组和顺铂（10μM）损伤组,连续培养48h后基底膜免疫荧光染色观察。2.取P0和P3大鼠基底膜培养,随机分为正常对照组和氨基糖苷类损伤组,氨基糖苷类抗生素包括新霉素、庆大霉素和卡那霉素,设置不同的药物浓度梯度,免疫荧光染色观察损伤情况。3.取P0和P3大鼠基底膜培养,随机分为正常对照组和新霉素损伤组,进行MitoSox Red检测和Cleaved Caspase-3染色,探讨耳毒性药物损伤基底膜可能的作用机制。结果P0、P1、P2和P3大鼠基底膜体外培养,一定浓度的顺铂,同时损伤毛细胞和螺旋神经元,建立稳定的药物损伤基底膜模型;而且随着仔鼠日龄的增加,同等浓度的顺铂损伤基底膜逐渐加重,即P3基底膜相较于P0顺铂损伤程度明显加重。P0和P3大鼠基底膜培养,氨基糖苷类损伤,观察发现氨基糖苷类损伤毛细胞从基底膜底转开始,随着浓度增加,逐渐损伤到基底膜顶转;同等浓度氨基糖苷类,P3相较于P0损伤在基底膜各转都更加严重。卡那霉素,可以同时损伤基底膜毛细胞和螺旋神经元,P3相比P0损伤更加严重。新霉素损伤基底膜,MitoSox Red检测与Cleaved Caspase-3染色,P3染色反应明显增强。结论取固定天数大鼠耳蜗的基底膜进行体外培养,一定浓度的耳毒性药物损伤,可以建立稳定的基底膜药物性损伤模型。随着耳毒性药物浓度的增加,基底膜损伤加重,可以根据实验需要选择合适的药物浓度。P0和P3基底膜培养,P0基底膜相较于P3对耳毒性药物损伤具有更强的耐受,其可能与ROS介导的细胞凋亡有关。第二部分DHCR24在大鼠耳蜗毛细胞中的表达及作用研究目的观察DHCR24在耳蜗Corti器中是否表达和细胞定位,顺铂引起毛细胞损失后的表达变化,并探讨DHCR24的作用及作用机制。方法1.新生P1的SD大鼠,取耳蜗及其他组织进行WB,明确DHCR24是否在耳蜗中表达。2.新生P1的SD大鼠,耳蜗组织切片和基底膜铺片观察DHCR24在Corti器中的细胞定位。3.新生P1的SD大鼠基底膜培养,随机分为正常对照组和顺铂处理组,观察顺铂引起的毛细胞损失及DHCR24的表达变化。4.新生P1的SD大鼠基底膜培养,顺铂损伤同时加入不同浓度DHCR24的抑制剂U18666A进行干预,观察抑制DHCR24的表达后顺铂引起的毛细胞损失的变化,明确DHCR24的作用。5.新生P1的SD大鼠基底膜培养,随机分为4组:第一组为正常对照组,第二组为顺铂处理组,第三组为顺铂处理+U18666A组,第四组为U18666A组。检测加入DHCR24的抑制剂U18666A进行干预后,基底膜DHCR24、ROS和cleaved-caspas-3表达变化,探讨DHCR24在顺铂引起毛细胞损失中的作用机制。结果DHCR24在大鼠各组织中广泛表达。免疫荧光染色发现DHCR24在大鼠耳蜗Corti器的毛细胞中表达。体外基底膜培养中,顺铂引起毛细胞损失,底转毛细胞损失较顶转毛细胞严重,建立体外药物损伤模型。顺铂造成毛细胞损失,同时引起DHCR24在毛细胞中的表达上调。加入DHCR24的抑制剂U18666A,发现抑制DHCR24的表达之后顺铂引起的毛细胞损失加重,且同时引起ROS和cleaved-caspas-3表达上调。结论DHCR24在新生大鼠耳蜗Corti器毛细胞中表达,抑制DHCR24的表达加重了顺铂引起的毛细胞损失,表明DHCR24对毛细胞有保护作用。抑制DHCR24的表达,增加了顺铂损伤引起的基底膜上ROS和cleaved-caspase-3表达,阐明了DHCR24可能通过抑制毛细胞线粒体内的氧化应激损伤,进而抑制DNA损伤和细胞凋亡从而起到保护听觉细胞的作用。第三部分DHCR24在大鼠耳蜗螺旋神经元中的表达及作用研究目的观察DHCR24在耳蜗螺旋神经节中是否表达和细胞定位,顺铂引起螺旋神经元损失后的表达变化,并探讨DHCR24可能发挥的作用。方法1.不同天数SD大鼠（P1、P14和P28）,取耳蜗进行冰冻组织切片,免疫荧光染色观察DHCR24在螺旋神经节表达。2.新生P1的SD大鼠,基底膜和细胞培养,免疫荧光染色观察,进一步明确DHCR24在螺旋神经节表达部位。3.新生P1的SD大鼠基底膜培养,加入顺铂,观察螺旋神经元损伤情况;顺铂损伤同时加入不同浓度DHCR24的抑制剂U18666A进行干预,观察抑制DHCR24的表达后顺铂引起的螺旋神经元损失的变化,明确DHCR24的作用。结果耳蜗冰冻切片免疫荧光染色,发现DHCR24在P1、P14和P28大鼠耳蜗螺旋神经元中表达。体外基底膜和细胞培养中,再次验证了DHCR24在P1大鼠耳蜗螺旋神经元中表达。体外基底膜培养,顺铂会引起螺旋神经元损伤;添加DHCR24的抑制剂U18666A,发现抑制DHCR24的表达之后顺铂引起的螺旋神经元损失加重。结论大鼠从出生到形成正常听力,DHCR24在大鼠耳蜗螺旋神经元中表达。体外基底膜培养,抑制DHCR24的表达会加重顺铂引起的螺旋神经元损失,表明DHCR24可能对螺旋神经元有保护作用。
程贵[7]（2019）在《自噬药物对顺铂引起斑马鱼毛细胞损伤及对损伤后再生的影响》文中研究表明目的:通过研究自噬药物对顺铂（CDDP）损伤斑马鱼侧线毛细胞的作用效果及损伤后的再生的影响,寻找可以保护顺铂耳毒性的药物。方法:本研究使用ET4+ET20的转基因斑马鱼系,使用雷帕霉素（mTOR抑制剂,自噬激活剂）/MHY1485（mTOR激活剂,自噬抑制剂）及SRT1720（SIRT1激活剂,自噬激活剂）/EX527（SIRT1抑制剂,自噬抑制剂）处理顺铂损伤的斑马鱼,观察斑马鱼侧线毛细胞数量的变化,判断各种药物对顺铂损伤毛细胞的保护及其再生的影响。结果:顺铂对斑马鱼侧线毛细胞具有损伤作用;雷帕霉素或SRT1720与顺铂同时加入较单独加入顺铂组斑马鱼侧线毛细胞的消失速度减慢;MHY1485或EX527与顺铂同时加入较单独加入顺铂组斑马鱼侧线毛细胞的消失速度加快;在顺铂处理之后,分别使用雷帕霉素、MHY1485、SRT1720和EX527处理,同一观察时间,雷帕霉素和SRT1720组毛细胞再生数量少,MHY1485和EX527组毛细胞再生数量多。结论:1、顺铂对斑马鱼侧线毛细胞有毒性作用;2、单纯自噬激活剂（雷帕霉素、SRT1720）,低浓度无明显损伤,高浓度会导致斑马鱼毛细胞损伤,甚至引起斑马鱼死亡;3、自噬激活剂雷帕霉素及SRT1720对顺铂引起的斑马鱼毛细胞的损伤具有保护作用;自噬抑制剂MHY1485和EX527会加重顺铂耳毒性;4、自噬激活剂（雷帕霉素、SRT1720）对顺铂损伤后的斑马鱼毛细胞的再生有抑制作用,自噬抑制剂（MHY1485/EX527）对顺铂损伤后的斑马鱼毛细胞的再生有促进作用。
朱丽军[8]（2018）在《补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠耳蜗P38MAPK的影响》文中研究指明目的本实验意在评估补肾聪耳方对药物性耳聋大鼠的治疗作用,同时研究该方剂对细胞凋亡信号通路P38MAPK的影响。通过对比三组大鼠的一般状态、体重变化、听力变化、血cAMP和cGMP的改变、耳蜗病理切片以及耳蜗P38蛋白的表达从而整体的评估补肾聪耳方的治疗作用,以期为临床使用补肾聪耳方防治药物性耳聋提供实验室依据。方法将通过ABR听力筛查的SD大鼠（45只）,按照随机数字表法分为3组（空白组、模型组、中药组）,中药组及模型组采用肌肉注射庆大霉素(100 mg·kg-1·d-1)连续14天的方法制造药物性耳聋大鼠模型,中药组在造模的基础上给予补肾聪耳方灌胃,空白组注射并灌胃等量生理盐水。观察三组大鼠一般情况,测量大鼠体重上升的差距,ABR测听力下降幅度。实验第15天取材,测量大鼠血浆cAMP和cGMP含量,使用HE染色法观察大鼠耳蜗病理改变,采用Western-Blot法和RT-PCR法检测大鼠耳蜗P38蛋白的含量。结果（1）一般状态评价模型组及中药组大鼠一般状态出现改变,空白组大鼠表现正常。中药组大鼠与模型组大鼠均出现了躁动不安,容易受到惊吓,怕人怕物,食量明显减少,但饮水增多,体重增长缓慢,大便干,尿量明显减少等一系列表现。但与模型组大鼠相比,中药组大鼠一般状态明显优于模型组。（2）体重增长幅度三组大鼠两周后体重评估,空白组、模型组和中药三组相比,空白组平均体重最高,增长速度最快。空白组与模型组相比,空白组体重增长快（P<0.01）,空白组与中药组相比,空白组体重增长快（P<0.01）,模型组与中药组相比,中药组体重增加较快（P<0.05）。（3）血浆cAMP和cGMP值比较模型组与空白组相比cAMP/cGMP值上升（P<0.05）,中药组与空白组相比cAMP/cGMP值上升（P<0.05）,模型组与中药组相比,模型组cAMP/cGMP值较高P<0.05)。（4）ABR测听比较三组大鼠ABR阈值相比空白组最低,其次是中药组,最后是模型组。空白组与模型组相比其ABR阈值最低（P<0.01）,空白组和中药组相比,其ABR阈值最低（P<0.01）;模型组与中药组相比,中药组ABR阈值较低（P<0.01）。（5）耳蜗病理切片比较空白组大鼠耳蜗切片正常。模型组大鼠和中药组大鼠耳蜗病理切片均出现毛细胞数量减少,排列不规则,螺旋神经节数量减少等情况。但整体上看,中药组病理切片相对模型组较好。（6）耳蜗P38蛋白含量Western-Blot与RT-PCR结果均显示:与模型组和中药组相比,空白组P38蛋白的表达偏低（P<0.05）,而中药组与模型组相比,中药组P38蛋白的表达相对较低（P<0.05）。结论三组大鼠ABR阈值的情况以及病理切片表明,药物性耳聋大鼠模型造模成功,结合大鼠一般状态、体重变化以及cAMP/cGMP值提示模型组与中药组两组大鼠整体状态与中医肾虚证型耳聋相似。中药组大鼠ABR阈值的改善以及耳蜗病理切片结果提示补肾聪耳方对药物性耳聋大鼠有一定的防治作用,因此采用补肾法治疗药物性耳聋方法可行。三组大鼠耳蜗P38蛋白表达提示庆大霉素所致药物性耳聋发病机制可能与开启MAPK细胞凋亡通道有关。而采用补肾聪耳方能有效抑制P38MAPK通道的开启从而对药物性耳聋起到防治作用。
孙常领[9]（2016）在《PEG-PLA纳米粒介导的地塞米松内耳持续递送及其拮抗顺铂耳毒性的实验研究》文中指出目的:探讨聚乙二醇-聚乳酸（PEG-PLA）纳米粒作为载体,经圆窗膜给药向内耳持续递送地塞米松的可行性;观察载有地塞米松的聚乙二醇-聚乳酸纳米粒经圆窗膜和腹腔注射给药拮抗顺铂耳毒性的效果。方法:利用乳化溶剂挥发法构建载有脂溶性地塞米松的聚乙二醇-聚乳酸纳米粒（DEX-NPs）,考察其载药量、包封率、粒径大小及分布、Zeta电位;用香豆素-6标记PEG-PLA纳米粒,研究经圆窗膜给药后PEG-PLA纳米粒在耳蜗内的分布;测定DEX-NPs圆窗膜给药后不同时间点外淋巴液中的地塞米松浓度,了解DEX-NPs经圆窗膜给药后的体内释放特征;通过构建豚鼠顺铂耳毒性动物模型,明确DEX-NPs经圆窗膜和经腹腔注射单次给药后拮抗顺铂耳毒性的效果,并对DEX-NPs体内应用的安全性进行初步评估。结果:通过乳化溶剂挥发法能成功制备DEX-NPs,扫描电镜下观察,DEX-NPs外观为球形,表面规整光滑,分散性良好,平均粒径为130±4.78 nm,表面电位为-26.13±3.28 mV,包封率为48.58±6.74%,载药量为8.24±2.85%;经圆窗膜给药后,香豆素-6标记的PEG-PLA纳米粒能迅速透过圆窗膜,主要分布于螺旋神经节,耳蜗外侧壁和耳蜗Corti’s器;DEX-NPs经圆窗膜给药后48 h,在外淋巴液中仍能测到较高浓度的地塞米松,而相同剂量的地塞米松经圆窗膜给药后12 h,在外淋巴液中已无法测到地塞米松;DEX-NPs经圆窗膜和经腹腔注射单次给药均能有效地减轻顺铂造成的耳蜗组织损伤和听力下降,而地塞米松经圆窗膜和腹腔注射单次给药不能有效地拮抗顺铂耳毒性;DEX-NPs经圆窗膜给药后未出现明显的听力下降,仅在圆窗龛及鼓阶内引起轻微的炎症反应,与生理盐水对照组相比无明显差别,DEX-NPs经腹腔注射给药也未引起明显的听力损失。结论:PEG-PLA是向内耳持续递送药物的理想载体;载有地塞米松的PEG-PLA纳米粒经圆窗膜和腹腔注射单次给药均能有效地拮抗顺铂耳毒性。
韩淼淼[10]（2015）在《顺铂耳毒性的离体实验研究》文中研究说明第一部分Polybrene对慢病毒载体耳蜗细胞的转染作用目的:观察病毒转染增强剂polybrene的耳毒性作用并进一步探讨其对慢病毒转染耳蜗细胞,特别是转染耳蜗毛细胞的作用。材料和方法:采用新生大鼠耳蜗基底膜培养的方法,应用0.1-10μg/ml polybrene处理耳蜗基底膜24小时,观察毛细胞形态、缺失率,并进一步评估polybrene对耳蜗细胞的安全浓度。其中,采用TUNEL和碘化丙啶染色观察2μg/ml polybrene作用后毛细胞的凋亡与坏死情况。慢病毒载体转染耳蜗细胞效率的测定采用不同浓度的慢病毒载体与耳蜗基底膜共培养24小时后,更换不含病毒载体的新鲜培养液继续培养48小时。评估各组耳蜗细胞转染效率后,选择最适慢病毒浓度,联合应用安全浓度的polybrene,观察polybrene对慢病毒载体转染耳蜗细胞的作用。结果:不同浓度polybrebe基底膜培养24小时发现:对照组毛细胞形态良好,0.1μg/ml组毛细胞形态基本接近对照组。0.5μg/ml组毛细胞纤毛轻度破坏,并出现零散的毛细胞缺失;当浓度增加到1μg/ml时,内外毛细胞纤毛明显倒伏,中度毛细胞缺失。当浓度达2μg/ml和5μg/ml时,毛细胞结构排列紊乱、大量毛细胞缺失,残存的毛细胞纤毛部分或全部丢失,后者更为严重。当浓度增加到10μg/ml,毛细胞罕见。各组内外毛细胞平均缺失率显示:与对照组相比,0.1μg/ml组内外毛细胞虽然有少量缺失,但是差异没有统计学意义（多样本秩和检验,两两比较,P>0.05）。0.5μg/ml polybrebe引起外毛细胞轻度缺失,与对照组相比差异没有统计学意义（多样本秩和检验,两两比较,P>0.05）。浓度超过0.5μg/ml后,各组内外毛细胞缺失率与对照组相比差异均有统计学意义（多样本秩和检验,两两比较,P<0.05）。碘化丙啶染色显示毛细胞细胞核呈碎片状、浓染,TUNEL凋亡检测未见阳性。周围支持细胞胞核形态良好。不同浓度慢病毒转染后平均GFP阳性细胞数目分别为62.75±18.65（1×106 IU）,196.83±22.34（5×106 IU）,205.42±5.74（1×107 IU）,1×107 IU慢病毒联合0.1μg/ml polybrene后平均GFP阳性细胞数目为247.44±13.51,与未联合polybrene相比差异有统计学意义（单因素方差分析,Bonferroni检验,P<0.05）。各组均未见毛细胞被转染。结论:0.1μg/ml polybrene对耳蜗毛细胞较为安全,0.5-10μg/ml polybrene对耳蜗毛细胞损伤呈剂量依赖性,并以细胞坏死方式导致细胞死亡,但对支持细胞无损伤。0.1μg/ml polybrene可以促进慢病毒载体对耳蜗基底膜除毛细胞以外的支持细胞的转染效率,但无论是否联合应用polybrene,慢病毒载体仅转染耳蜗基底膜支持细胞,不能转染耳蜗毛细胞。Polybrene可用于慢病毒载体对耳蜗基底膜支持细胞的转染。第二部分细胞自噬在顺铂耳毒性中的作用目的:探讨在离体耳蜗器官培养条件下,不同浓度顺铂对耳蜗细胞的损伤规律及其机制。材料和方法:采用新生大鼠耳蜗基底膜体外培养技术,应用不同浓度的顺铂与基底膜共培养48小时,荧光显微镜下观察各组毛细胞和螺旋神经节形态,绘制耳蜗毛细胞图并计数毛细胞缺失率,并应用透射电镜观察各组毛细胞与螺旋神经节超微结构,应用免疫印迹检测各组自噬蛋白beclin1表达情况,以及应用10μM顺铂与基底膜共培养24小时、48小时、72小时,通过TUNEL法检测各时间点耳蜗细胞凋亡情况。结果:离体耳蜗器官培养条件下,对照组毛细胞形态良好;10μM顺铂组毛细胞排列紊乱,内外毛细胞约70%毛细胞缺失;100μM顺铂组导致毛细胞形态大量破坏,形成细胞碎片,内外毛细胞缺失达90%以上;与对照组相比,400μM顺铂毛细胞形态良好,数目未见明显缺失。对照组神经纤维束清晰可见,神经节细胞胞体形状规则;10μM组神经纤维大量减少,相对应的神经节细胞亦大量缺失,残留的神经纤维和节细胞形态尚可;100μM组神经纤维和神经节细胞进一步加重,这些神经纤维明显纤细,相对应的神经节细胞胞体形态不规则;与对照组相比,400μM组神经纤维和神经节细胞数目未见明显缺失,神经节细胞胞体形态规则,但胞体体积变小。在透射电镜下,10μM顺铂组见毛细胞和螺旋神经节具有典型的凋亡特征即核固缩、核碎裂;400μM组毛细胞线粒体稍肿胀,其与对照组毛细胞内均可见双侧膜包绕的自噬体,二者的螺旋神经节均未见明显病变。自噬蛋白beclin1表达水平随顺铂浓度增加具有先减少后而增加的趋势。TUNEL检测显示10μM顺铂与基底膜共培养24小时未见毛细胞凋亡,48小时后可见毛细胞大量凋亡,72小时后几乎所有毛细胞发生凋亡。结论:离体耳蜗器官培养条件下,顺铂耳毒性并不是浓度依赖性的,低浓度顺铂对毛细胞和螺旋神经节具有明显损伤作用,这种损伤主要由细胞凋亡引起,而高浓度顺铂未见明显细胞损伤,可能与自噬的激活有关,自噬的激活减缓了顺铂耳毒性,对毛细胞和螺旋神经节具有保护作用。第三部分铜转运蛋白在耳蜗组织中的表达目的:观察铜转运蛋白2在耳蜗组织中的定位表达,并进一步探讨顺铂对铜转运蛋白1和铜转运蛋白2表达的影响。材料和方法:应用耳蜗基底膜分离取材技术,取出生后3-5天的大鼠耳蜗基底膜组织固定,采用铜转运蛋白2免疫荧光染色和鬼笔环肽复染,观察铜转运蛋白2的表达及定位情况。并采用耳蜗器官离体培养技术,离体耳蜗器官与10μM顺铂共培养48小时后,用免疫印迹法检测铜转运蛋白1和铜转运蛋白2的表达情况。结果:毛细胞和血管纹边缘细胞的胞浆内可见铜转运蛋白2免疫荧光染色阳性;免疫印迹法结果显示对照组和10μM顺铂组均可见铜转运蛋白1表达,应用10μM顺铂培养48小时后铜转运蛋白1表达未见明显变化,两组均未检测到铜转运蛋白2表达。结论:铜转运蛋白1和铜转运蛋白2均在耳蜗组织中表达,其中铜转运蛋白2在耳蜗毛细胞和血管纹边缘细胞胞浆内表达。
二、顺铂对耳蜗毒性的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、顺铂对耳蜗毒性的实验研究（论文提纲范文）
（1）顺铂耳毒性大鼠耳聋模型的研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 听性脑干反应检测 |
| 1.3 免疫荧光染色 |
| 1.3.1 基底膜铺片 |
| 1.3.2 耳蜗切片 |
| 1.4 耳蜗器官培养 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 体内实验三组大鼠药物注射后的听力情况 |
| 2.2 体内实验免疫荧光染色观察耳蜗细胞形态变化 |
| 2.3 体外实验免疫荧光染色观察耳蜗细胞形态变化 |
| 3 讨论 |
（2）地塞米松-丹酚酸B缀合物及其自递送系统对顺铂致聋的防治作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 顺铂药源性聋 |
| 1.2 药-药缀合物及其自递送系统 |
| 1.3 纳米药物递送系统在防治内耳疾病中的应用 |
| 1.4 本课题的研究内容及意义 |
| 第二章 地塞米松-丹酚酸B缀合物的合成及稳定性研究 |
| 2.1 材料与仪器 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 仪器 |
| 2.1.3 试剂的处理及纯化 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 缀合物的合成与表征 |
| 2.2.2 缀合物的稳定性考察 |
| 2.2.2.1 缀合物在人工外淋巴液中的稳定性考察 |
| 2.2.2.2 缀合物在PBS溶液中的稳定性考察 |
| 2.3 结果和讨论 |
| 2.3.1 缀合物的合成与表征 |
| 2.3.1.1 缀合物1的合成与表征 |
| 2.3.1.2 缀合物2的合成与表征 |
| 2.3.2 缀合物的稳定性 |
| 2.3.2.1 缀合物在人工外淋巴液中的稳定性 |
| 2.3.2.2 缀合物在PBS溶液中的稳定性考察 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 地塞米松-丹酚酸B缀合物自递送系统的制备与表征 |
| 3.1 材料与仪器 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 仪器 |
| 3.1.3 细胞株 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 缀合物自递送系统的制备 |
| 3.2.1.1 缀合物1纳米粒的制备 |
| 3.2.1.2 缀合物2纳米粒的制备 |
| 3.2.1.3 缀合物自递送系统的粒径分析 |
| 3.2.2 缀合物自递送系统的的稳定性考察 |
| 3.2.2.1 考察不同温度中的稳定性 |
| 3.2.2.2 考察不同pH中的稳定性 |
| 3.2.2.3 考察在含10%FBS中的稳定性 |
| 3.2.3 缀合物自递送系统的药物释放研究 |
| 3.2.4 缀合物自递送系统于HEI-OC1细胞中的摄取实验 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 缀合物自递送系统的制备和粒径分析 |
| 3.3.2 缀合物自递送系统的稳定性 |
| 3.3.2.1 不同温度下自递送系统的稳定性 |
| 3.3.2.2 不同pH中自递送系统的稳定性 |
| 3.3.2.3 含10%FBS中自递送系统的稳定性 |
| 3.3.3 缀合物自递送系统的体外药物释放 |
| 3.3.4 缀合物自递送系统于HEI-OC1细胞中的摄取 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 地塞米松-丹酚酸B缀合物及其自递送系统对顺铂药源性聋的防治作用 |
| 4.1 材料与仪器 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 仪器 |
| 4.1.3 斑马鱼和豚鼠 |
| 4.1.3.1 斑马鱼 |
| 4.1.3.2 豚鼠 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 体内模型的选择 |
| 4.2.2 缀合物及自递送系统对顺铂所致斑马鱼损伤的考察 |
| 4.2.2.1 斑马鱼养殖 |
| 4.2.2.2 顺铂造模与给药 |
| 4.2.2.3 斑马鱼毛细胞损伤的评价 |
| 4.2.3 缀合物顺反异构单体对顺铂所致豚鼠毛细胞损伤的考察 |
| 4.2.3.1 溶液的配制 |
| 4.2.3.2 顺铂造模与给药 |
| 4.2.3.3 豚鼠毛细胞成像 |
| 4.2.4 统计学分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 缀合物及其自递送系统对顺铂所致斑马鱼损伤的作用 |
| 4.3.2 缀合物顺反异构单体对顺铂所致豚鼠毛细胞损伤的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 地塞米松-丹酚酸B缀合物及其自递送系统与内耳组织糖皮质激素受体的相互作用研究 |
| 5.1 材料与仪器 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 仪器 |
| 5.1.3 豚鼠 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 缀合物及其自递送系统与内耳组织糖皮质激素受体的相互作用考察 |
| 5.2.1.1 动物分组及给药 |
| 5.2.1.2 耳蜗样品的处理 |
| 5.2.2 缀合物及其自递送系统经鼓室给药外淋巴液药物浓度的测定 |
| 5.2.2.1 动物分组及给药方法 |
| 5.2.2.2 取材方法 |
| 5.2.3 数据处理 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 缀合物及其自递送系统与内耳组织糖皮质激素受体的相互作用 |
| 5.3.2 缀合物及纳米粒经鼓室给药外淋巴液的药物浓度 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 地塞米松-丹酚酸B及其自递送系统对顺铂抗癌作用的影响 |
| 6.1 材料与仪器 |
| 6.1.1 材料 |
| 6.1.2 仪器 |
| 6.1.3 细胞株 |
| 6.2 方法 |
| 6.2.1 缀合物及其自递送系统对顺铂刺激的HepG2细胞存活率的考察 |
| 6.2.2 缀合物及其自递送系统对顺铂刺激的MCF-7细胞存活率的研究 |
| 6.2.3 缀合物及其自递送系统对顺铂刺激的A549细胞存活率的研究 |
| 6.2.4 数据处理 |
| 6.3 结果与讨论 |
| 6.3.1 缀合物及其自递送系统对顺铂刺激的HepG2细胞存活率的影响 |
| 6.3.2 缀合物及其自递送系统对顺铂刺激的MCF-7细胞存活率的影响 |
| 6.3.3 缀合物及其自递送系统对顺铂刺激的A549细胞存活率的影响 |
| 6.4 本章小结 |
| 第七章 地塞米松-丹酚酸B缀合物及其自递送系统的安全性评价 |
| 7.1 材料和仪器 |
| 7.1.1 材料 |
| 7.1.2 仪器 |
| 7.1.3 斑马鱼和豚鼠 |
| 7.1.3.1 斑马鱼 |
| 7.1.3.2 豚鼠 |
| 7.2 方法 |
| 7.2.1 缀合物及其自递送系统对斑马鱼胚胎发育的实验 |
| 7.2.2 缀合物及其自递送系统对豚鼠听力阈值的考察 |
| 7.2.3 缀合物及其自递送系统对豚鼠内耳组织的的研究 |
| 7.3 结果 |
| 7.3.1 缀合物及其自递送系统对斑马鱼胚胎发育的毒性 |
| 7.3.2 缀合物及其自递送系统对豚鼠听力阈值的影响 |
| 7.3.3 缀合物及其自递送系统对豚鼠内耳组织的毒性 |
| 7.4 本章小结 |
| 第八章 结论与展望 |
| 8.1 结论 |
| 8.2 展望 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 缩略词一览表 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
（3）从“瘀毒伤络”理论探讨顺铂致药物性耳聋机制（论文提纲范文）
| 1 “瘀毒伤络”与“毒聋” |
| 1.1 “脉络”“络脉”均为“络” |
| 1.2 “瘀滞”“血瘀”皆为“瘀” |
| 1.3 “内毒”“外毒”皆为“药毒” |
| 1.4 “毒”“瘀”“瘀”循环往复 |
| 2 基于“毒聋”病机定“行气解毒、化瘀通络”治则 |
| 3 川芎嗪为治疗“毒聋”之要药 |
| 4 结语 |
（4）顺铂毒性损伤机制及中药防治机制的研究进展（论文提纲范文）
| 1 顺铂引起机体脏器的损伤机制 |
| 1.1 肾损伤机制 |
| 1.2 肝损伤机制 |
| 1.3 耳损伤机制 |
| 1.4 心脏损伤机制 |
| 1.5 神经损伤机制 |
| 1.6 其他 |
| 2 中药对CP毒性的防治机制 |
| 2.1 改善机体氧化应激状态 |
| 2.2 抑制正常细胞凋亡 |
| 2.3 抑制机体炎症损伤 |
| 2.4 激活细胞自噬 |
| 2.5 调节药物转运蛋白的异常表达 |
| 3 讨论 |
（5）抑制糖原合成酶激酶3β活性通过调节自噬拮抗顺铂耳毒性（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 糖原合成酶激酶3(GSK-3β)抑制剂氯化锂(Li Cl)拮抗大鼠顺铂耳中毒性聋 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 细胞自噬在抑制 GSK-3β拮抗顺铂致听毛细胞的损伤中作用 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述一 自噬与人类疾病的关系及分子机制 |
| 参考文献 |
| 综述二 糖原合成酶激酶-3与人类疾病的相关性研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 攻读博士学位期间发表论文目录和基金 |
| 致谢 |
（6）DHCR24在大鼠耳蜗中的表达及作用机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 基底膜培养药物损伤模型的建立 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂和耗材 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 基底膜培养 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 免疫荧光染色 |
| 2.4 MitoSOX Red检测 |
| 2.5 Cleaved caspase-3 染色 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 大鼠P0、P1、P2和P3 基底膜体外培养顺铂损伤造模 |
| 3.2 大鼠P0和P3 基底膜对氨基糖苷类抗生素耳毒性耐受性不同 |
| 3.3 新霉素损伤P0和P3 基底膜,检测ROS和Cleaved Caspase-3 表达 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 DHCR24 在大鼠耳蜗毛细胞中的表达及作用研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂和耗材 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 Western Blot |
| 2.2 耳蜗切片和铺片 |
| 2.3 免疫荧光染色 |
| 2.4 基底膜培养 |
| 2.5 MitoSOX Red检测 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 DHCR24 在大鼠耳蜗Corti器中表达 |
| 3.2 顺铂损伤毛细胞引起毛细胞中DHCR24 表达上调 |
| 3.3 抑制DHCR24 会增加顺铂对毛细胞的损失 |
| 3.4 抑制DHCR24 会增加顺铂损伤后细胞内ROS水平和毛细胞凋亡 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 DHCR24 在大鼠耳蜗螺旋神经元中的表达及作用研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂和耗材 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 耳蜗冰冻切片 |
| 2.2 基底膜培养和螺旋神经元培养 |
| 2.4 免疫荧光染色 |
| 3 结果 |
| 3.1 DHCR24 在大鼠耳蜗螺旋神经节的表达 |
| 3.2 抑制DHCR24 会增加顺铂对螺旋神经元的损失 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（7）自噬药物对顺铂引起斑马鱼毛细胞损伤及对损伤后再生的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1.前言 |
| 1.1 毛细胞 |
| 1.2 顺铂耳毒性的研究现状 |
| 1.3 自噬及其与顺铂耳毒性的相关性 |
| 1.4 毛细胞再生的相关研究 |
| 1.5 斑马鱼模型的优势 |
| 2.研究目的 |
| 3.实验方法 |
| 3.1 使用材料与仪器 |
| 3.2 实验步骤 |
| 4.实验结果 |
| 4.1 药物浓度梯度实验结果(所有毛细胞数均为各毛细胞簇计数之均数) |
| 4.2 自噬相关药物对顺铂损伤毛细胞的作用结果 |
| 4.3 自噬相关药物对顺铂损伤毛细胞的再生作用结果 |
| 5.讨论 |
| 6.结论 |
| 7.总结与展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间发表论文 |
| 致谢 |
（8）补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠耳蜗P38MAPK的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 主要符号表 |
| 前言 |
| 实验一 补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠听力及耳蜗形态学影响..3 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 观察指标及意义 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 实验二 补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠耳蜗P38蛋白的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 观察指标及检验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（9）PEG-PLA纳米粒介导的地塞米松内耳持续递送及其拮抗顺铂耳毒性的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 载有地塞米松的聚乙二醇聚乳酸纳米粒的制备与表征 |
| 1 仪器和材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 PEG-PLA纳米粒经圆窗膜给药后体内分布及体内释放研究 |
| 1 仪器和材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 载地塞米松的PEG-PLA纳米粒经圆窗膜给药拮抗顺铂耳毒性的研究 |
| 1 仪器和材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 载地塞米松的PEG-PLA纳米粒全身给药拮抗顺铂耳毒性的研究 |
| 1 仪器和材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（10）顺铂耳毒性的离体实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词 |
| 绪论 |
| 第一部分Polybrene对慢病毒载体耳蜗细胞的转染作用 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 第二部分 细胞自噬在顺铂耳毒性中的作用 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第三部分 铜转运蛋白在耳蜗组织中的表达 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间撰写及发表的学术论文 |
四、顺铂对耳蜗毒性的实验研究（论文参考文献）
- [1]顺铂耳毒性大鼠耳聋模型的研究[J]. 胡鹏刚,田克勇,毛小波,王人凤,查定军. 现代生物医学进展, 2021
- [2]地塞米松-丹酚酸B缀合物及其自递送系统对顺铂致聋的防治作用研究[D]. 叶瑞琴. 广东药科大学, 2021(02)
- [3]从“瘀毒伤络”理论探讨顺铂致药物性耳聋机制[J]. 冷辉,张琦,孙海波. 中国中医基础医学杂志, 2020(10)
- [4]顺铂毒性损伤机制及中药防治机制的研究进展[J]. 闫潇,邓毅,马骏,李鹏杰,杨志军,杨秀娟,周燕. 中国实验方剂学杂志, 2021(05)
- [5]抑制糖原合成酶激酶3β活性通过调节自噬拮抗顺铂耳毒性[D]. 刘天乙. 华中科技大学, 2020(01)
- [6]DHCR24在大鼠耳蜗中的表达及作用机制研究[D]. 田克勇. 中国人民解放军空军军医大学, 2019(06)
- [7]自噬药物对顺铂引起斑马鱼毛细胞损伤及对损伤后再生的影响[D]. 程贵. 暨南大学, 2019(02)
- [8]补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠耳蜗P38MAPK的影响[D]. 朱丽军. 山西中医药大学, 2018(01)
- [9]PEG-PLA纳米粒介导的地塞米松内耳持续递送及其拮抗顺铂耳毒性的实验研究[D]. 孙常领. 上海交通大学, 2016
- [10]顺铂耳毒性的离体实验研究[D]. 韩淼淼. 上海交通大学, 2015(02)