一、大鼠心肌顿抑时血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量的变化（论文文献综述）
肖燕[1]（2020）在《基于mTORC1-ULK1-FUNDC1通路的电针预处理减轻MIRI的线粒体自噬机制研究》文中研究指明目的:1、比较不同电流强度电针预处理（EAP）对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的影响,并明确其效应差异,探索EAP抗MIRI的相对适宜电流强度。2、探索mTORC1在EAP抗MIRI保护效应中与线粒体自噬的相关性。3、探索EAP调控MIRI大鼠线粒体自噬的mTORC1-ULK1-FUNDC1信号机制。方法:1、将120只SPF级成年雄性SD大鼠随机分为8组:模型组（I/R组）、模型+非电针对照组（I/R+SEA组）、模型+0.2mA电流强度电针预处理4d组（I/R+0.2mA组）、模型+1mA电流强度电针预处理4d组（I/R+1mA组）、模型+2mA电流强度电针预处理4d组（I/R+2mA组）、模型+4mA电流强度电针预处理4d组（I/R+4mA组）、模型+6mA电流强度电针预处理4d组（I/R+6mA组）、模型+8mA电流强度电针预处理4d组（I/R+8mA组）,每组各15只。各电针预处理组分别于MIRI手术前4天（d）干预,选择大鼠双侧“内关”穴（PC6）进行电针（2/100Hz）,20min/次,1次/d。I/R+SEA组每天进行与其他组相同方式、时间的异氟烷吸入麻醉但不电针。各组均于第5d结扎心脏冠状动脉左前降支（LAD）30min,再灌注4h,建立心肌缺血再灌注损伤模型,期间进行心电图（ECG）监测。每天监测大鼠体重变化,再灌注4h后,统计室性心律失常评分（VAS）情况,并对各组大鼠生存情况进行生存曲线分析;采用Evans blue-TTC双染法染色切片,计算心肌梗死面积比（Infarct size,IS%）、风险面积比（Risk size）;利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌钙蛋白T（cTnT）的浓度。2、在探索了电针预处理抗MIRI的相对适宜电流强度基础上,进行实验二和实验三。实验二将140只SPF级成年雄性SD大鼠,随机分为5组,分别为:假手术组（S组）,除不结扎LAD,余与模型组操作相同;假手术+电针预处理组（S+EA组）,除不结扎LAD,余与模型+电针预处理组操作相同;模型组（I/R组）,同“方法1”中的造模方法;模型+非电针预处理组（I/R+SEA组）,在大鼠两侧PC6皮肤表面贴上与电针同样大小的自制的竹制签子20min/次/d,连续4d,第5天造模;模型+电针预处理组（I/R+EA组）,每天电针1次（2mA,2/100Hz,20min）,连续4d,第5天造模。每组各28只。实验三将196只SPF级成年雄性SD大鼠,随机分为7组,分别为:I/R组,同上;I/R+EA组,同上;空白对照组（B组）,未做干预处理;模型+阴性对照预处理组（I/R+C组）,腹腔注射与抑制剂组等量的助溶剂,1次/d,连续4d,并于第5天造模;模型+阴性对照+电针预处理组（I/R+C+EA组）,每天电针1次、腹腔注射与抑制剂组等量的助溶剂1次,连续4d,第5天造模;模型+mTORC1抑制剂（雷帕霉素,Rapamycin）预处理组（I/R+R组）,腹腔注射雷帕霉素,每天1次,3.0mg/kg,连续3d,并于最后1次注射24h后造模;模型+mTORC1抑制剂+电针预处理组（I/R+R+EA组）,每天电针1次,连续4d;电针第2天,同时开始给予腹腔注射雷帕霉素,每天1次,连续3d,于最后1次注射24h后造模。每组各28只。每天监测大鼠体重变化,并在实验结束后对各组大鼠生存情况进行生存曲线分析;采用ECG检测心脏ST段变化,并对缺血期的前20min和再灌注期的前20min及220-240min进行VAS统计;Evans blue-TTC双染色法观察心肌梗塞面积情况,计算IS%与Risk size;ELISA法测定血清心肌酶谱CK-MB、LDH、cTnT的水平;采用末端脱氧核苷酰转移酶介导的DUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡,评价心肌细胞存活情况,全面充分评价心脏功能情况。在充分明确EAP对MIRI保护效应的基础上,采用透射电镜观察自噬囊泡（即自噬小体）水平;免疫荧光染色法检测线粒体、溶酶体及两者结合情况,评价EAP抗MIRI效应与线粒体自噬的相关性。采用蛋白免疫印迹（WB）、免疫组化法（IHC）分别检测心肌组织线粒体中LC3-I（mito-LC3-I）与LC3-Ⅱ（mito-LC3-Ⅱ）、心肌中mTORC1、ATG13、ULK1、p-ULK1、FUNDC1、p-FUNDC1等物质的分布和表达水平;采用大鼠能量（ATP）ELISA试剂盒检测左心室心肌组织中线粒体的ATP产生情况,整体分析EAP通过mTORC1-ULK1-FUNDC1信号通路调控线粒体自噬从而减轻MIRI的可能潜在机制。结果一:不同电流强度EAP对MIRI的效应差异1、不同电流强度EAP对各组大鼠体重及MIRI术后生存曲线的影响各组大鼠体重变化表明,EAP电流强度为0.2mA、1mA与2mA时,EAP的大鼠体重呈正常增长趋势,而电流强度为4mA、6mA、8mA时大鼠体重随着EAP电流强度的增大,体重出现不增反减的趋势;对生存曲线的分析结果显示,与I/R组比,EAP各组的存活率均升高,但0.2mA、1mA与2mA时的大鼠术后存活率高于4mA、6mA与8mA组。2、不同电流强度EAP抗MIRI的效应研究大鼠VAS、心脏Evans blue-TTC双染色及血清心肌酶谱结果表明,与I/R组比,不同电流强度EAP均可有效降低MIRI。VAS结果显示,EAP（仅I/R+2mA组）可有效降低室性心律失常评分VAS（P<0.05）。Evans blue-TTC染色结果显示,与I/R组比,EAP（I/R+0.2mA 组、I/R+1mA 组、I/R+2mA 组、I/R+4mA 组、I/R+6mA 组、I/R+8mA 组）可明显降低 IS%、Risk size（P<0.05）,其中 I/R+2mA 组的 IS%、Risk size 值最小（P<0.05）;而与 I/R+2mA 组相比,I/R+4mA 组、I/R+6mA 组、I/R+8mA 组的 IS%增加（P<0.05）,其中 I/R+6mA 组、I/R+8mA 组 IS%显着增加（P<0.01）。与 I/R+2mA 组相比,I/R+SEA 组、I/R+0.2mA 组、I/R+1mA 组、I/R+6mA 组、I/R+8mA 组心肌 Risk size 均增加（P<0.05）。血清心肌酶谱结果表明,与I/R组比,不同电流强度EAP均可有效降低血清CK（P<0.05）、CK-MB（P<0.05）、LDH（P<0.05）、cTnT（P<0.05）的水平。其中 I/R+2mA 组的心肌酶谱水平均最低,效应最佳。结果二:EAP调控MIRI大鼠线粒体自噬的效应研究1、EAP对各组大鼠体重及MIRI术后生存曲线的影响各组大鼠体重及术后生存曲线的结果表明,与I/R组比,EAP可促进大鼠体重稳步增长,并有效提高大鼠MIRI术后存活率。2、对 VAS、IS%及 Risk size 的影响结果显示,与I/R组比,EAP可有效降低VAS（P<0.05）、降低IS%（P<0.05）及Risk size（P<0.05）。3、EAP减少MIRI诱导的心肌损伤标志物和细胞凋亡结果显示,与I/R组比,I/R+EA组可降低血清CK-MB（P<0.05）、LDH（P<0.05）、cTnT（P<0.05）的水平,减少心肌细胞凋亡（P<0.05）,从而减轻MIRI,对心脏起到保护作用。4、EAP减弱MIRI诱导的线粒体自噬与S组相比,I/R和I/R+SEA组的自噬囊泡明显增加（P<0.01）。与I/R组相比,EAP（I/R+EA组）显着减少了再灌注240min后心肌组织自噬囊泡的数量（P<0.05）,即EAP可抑制线粒体与溶酶体的结合。5、EAP 调节 mTORC1、ULK1 和 FUNDC1 的表达采用WB、IHC检测心肌组织中的mTORC1、ULK1、FUNDC1蛋白表达,结果初步显示,EAP可促进mTORC1蛋白的表达,抑制线粒体自噬相关蛋白ULK1、FUNDC1的表达水平。结果三:EAP调控MIRI大鼠线粒体自噬的mTORC1-ULK1-FUNDC1信号机制研究1、雷帕霉素阻断了 EAP的心脏保护作用各组大鼠体重及术后生存曲线的结果表明,在应用雷帕霉素抑制mTORC1蛋白后,消除了 EAP促进MIRI大鼠体重稳步增长,并有效提高大鼠MIRI术后存活率这一保护作用。在应用雷帕霉素抑制mTORC1蛋白后,消除了 EAP对MIRI的保护效应:与I/R组比,I/R+R+EA组的VAS升高（P<0.05）、IS%（P<0.05）及Risk size（P<0.05）也升高、血清CK-MB（P<0.05）、LDH（P<0.05）、cTnT（P<0.05）的水平均升高,心肌细胞凋亡率也增加（P<0.05）。2、雷帕霉素减弱EAP抑制的线粒体自噬结果显示,在应用雷帕霉素抑制mTORC1蛋白后,消除了 EAP对MIRI线粒体自噬的抑制效应:I/R+R+EA组的自噬囊泡水平（P<0.05）升高,线粒体与溶酶体的结合（P<0.05）增加,表明线粒体自噬的水平增加,从而使MIRI加重。3、EAP通过mTORC1-ULK1-FUNDC1途径抑制线粒体自噬WB、IHC检测mTORC1-ULK1-FUNDC1信号通路中的相关蛋白:心肌组织mTORC1、ATG13、p-ULK1、ULK1、p-FUNDC1、FUNDC1 及心肌线粒体中 mito-LC3Ⅰ、mito-LC3Ⅱ,结果显示,EAP可促进mTORC1蛋白的表达,抑制线粒体自噬相关蛋白ATG13、p-ULK1、ULK1、p-FUNDC1、FUNDC1、mito-LC3Ⅱ/Ⅰ 的表达水平（全部,P<0.05）,但在应用雷帕霉素抑制mTORC1蛋白后,EAP的这些调节作用则受到抑制（P<0.05）。对ATP（三磷酸腺苷）检测水平的结果显示,心肌缺血再灌注损伤后FUNDC1蛋白诱导的线粒体自噬会通过过度消除线粒体而增加心肌细胞凋亡（P<0.05）,线粒体数量的绝对不足而导致ATP产生障碍。但在PC6上进行EAP可逆转这种情况:EAP可促进线粒体内ATP的产生（P<0.05）,防治MIRI。而应用雷帕霉素后,EAP的这一促进作用则受到抑制。结论:1、不同电流强度EAP“内关”穴4天均可有效抗MIRI,其中2mA电流强度的EAP保护效应最好。2、EAP“内关”穴减轻MIRI大鼠的心肌保护效应可能与其促进心肌组织mTORC1蛋白的表达,同时下调ULK1、FUNDC1蛋白的表达,从而抑制线粒体自噬的发生有关。说明mTORC1在EAP抗MIRI中可能起关键性的作用。3、雷帕霉素抑制mTORC1后消除了 EAP“内关”穴对MIRI大鼠的心肌保护效应,说明EAP对MIRI的心肌保护效应可能是通过mTORC1-ULK1-FUNDC1这一信号通路调控线粒体自噬,进而增加线粒体来源的ATP,改善MIRI后的能量供应来实现的。
王乾[2]（2020）在《大鼠心肌缺血再灌注损伤后脊髓代谢物变化 ——基于NMR的代谢组学分析》文中指出研究背景:目前缺血性心脏病仍旧是危害人类健康的首要病因。缺血性心脏病患者恢复血流灌注后会造成心肌再灌注损伤。胸段脊髓支配心脏,在向上传导痛觉,向下传导交感神经信号过程中发挥着重要作用,但脊髓在心肌缺血再灌注损伤这一病理生理过程中扮演的角色却了解甚少。研究目的:本研究旨在通过1H MRS技术,同时对多种小分子化合物进行分析,探究心肌缺血再灌注损伤后脊髓的小分子代谢物的变化。研究方法:将32只SD大鼠随机分为2组,Control组和IR组各16只。称重后麻醉,气管插管机械通气,IR组由左侧4-5肋间开胸,结扎冠脉左前降支,保持缺血30min,松开结扎线再灌注2h。Control组除只用丝线穿过左前降支不结扎外,其余处理与对照组处理完全相同。再灌注结束后取下心肌行HE和TTC染色验证是否造模成功。取颈段和胸段脊髓作为标本,一部分提取RNA,进行相关分子生物学检测,另一部分经微波处理后提取小分子化合物,通过1H核磁共振技术检测Control组和IR组不同节段脊髓中氨基酸等小分子的变化情况。研究结果:（1）与Control组相比,IR组心肌TTC染色发现梗死心肌组织,HE染色显示IR组心肌细胞排列紊乱,可见炎症细胞浸润;（2）NMR代谢组学分析发现与Control组相比,IR组大鼠上胸段（T1-6）脊髓牛磺酸含量高于Control组（3.53±0.16vs.2.84±0.16μmol/g,p=0.011）,而且上胸段脊髓谷氨酸/牛磺酸的比值（1.17±0.04 vs.1.37±0.08,p=0.043）、谷氨酸/（γ-氨基丁酸+牛磺酸）的比值（0.71±0.01 vs.0.78±0.03,p=0.048）低于Control组;在颈段（C1-8）脊髓,IR组甘氨酸（3.98±0.08vs.4.26±0.08μmol/g,p=0.033）和谷氨酸（3.88±0.17 vs.4.33±0.11μmol/g,p=0.042）的含量低于Control组。而下胸段脊髓（T7-13）这些代谢物两组之间没有明显变化。研究结论:牛磺酸、甘氨酸和谷氨酸可能参与脊髓对心肌缺血再灌注损伤的调控。脊髓谷氨酸/牛磺酸、谷氨酸/（γ-氨基丁酸+牛磺酸）的比值可能作为心肌缺血再灌注损伤的潜在评价指标。
王雪[3]（2019）在《运动预处理对老龄大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响》文中认为目的:观察运动预处理对老龄大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及心肌Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响,探讨其相关机制。方法:将48只雄性SD老龄大鼠随机分成对照组、模型组、运动预处理+模型组、运动预处理+对照组,每组12只。采用Langendorff离体灌流系统建立大鼠离体心肌缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）模型。本实验检测的指标:全程监测并记录平衡灌注末期与再灌注末期各实验组心率与左心室发展压等心功能相关指标;再灌注结束后,选用TTC染色法测量大鼠心肌梗死面积;利用透射电镜观察老龄大鼠心肌细胞超微结构和自噬体的形成;采用Western Blot法检测老龄大鼠心肌内Beclin 1、Atg5蛋白表达含量。结果:1.各组大鼠心功能变化:与模型组比较,对照组、运动+对照组、运动+模型组的心功能指标均升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组比较,运动+对照组心功能指标升高,差异有统计学意义（P<0.05）;2、各组大鼠心肌梗死面积:与模型组相比,运动+模型组心肌梗死面积减小,差异有统计学意义（P<0.05）;对照组与运动+对照组不存在心肌梗死区域。3、各组大鼠心肌细胞超微结构与自噬体的变化:对照组与运动+对照组在透射电镜下的心肌纤维排列均整齐且紧密,心肌细胞形态正常,细胞核膜完整,基本未见自噬体,运动+对照组较对照组的线粒体嵴数量更丰富;模型组出现明显的自噬体,心肌纤维束排列疏松紊乱,心肌细胞线粒体肿胀,嵴密度降低,很难见完整的细胞器结构;运动+模型组的心肌细胞超微结构较模型组明显改善,电镜下可观察到肌原纤维排列整齐,肌小节完整,线粒体形态和结构基本正常,视野内有少量自噬体出现。4、各组大鼠心肌Beclin 1、Atg-5蛋白表达含量:与模型组比较,对照组Beclin1、Atg-5蛋白表达明显降低,差异有显着统计学意义（P<0.01）,运动+模型组Beclin1、Atg-5蛋白表达降低,差异有统计学意义（P<0.05）;对照组心肌内Beclin 1、Atg-5蛋白表达处于基础水平,与对照组比较,运动+对照组Beclin 1、Atg-5蛋白增加,差异有统计学意义（P<0.05）;结论:1.运动预处理可改善老龄大鼠心脏功能,减小心肌梗死面积,发挥心脏保护作用。2.运动预处理可通过调节老龄大鼠心肌细胞中Beclin 1、Atg-5蛋白表达,降低心肌细胞过度自噬,减轻心肌缺血/再灌注损伤。
李欣,郑玉云,杨玉梅[4]（2017）在《三味檀香汤散对心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量影响的研究》文中研究指明目的研究三味檀香汤散调节心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽（CGRP）的含量,为三味檀香汤散改善和保护心肌顿抑的作用和作用机制提供新的理论依据。方法雄性SD大鼠随机分成三味檀香汤散大、中、小剂量组（简称大、中、小剂量组）、硝苯地平对照组（简称硝苯地平组）、心肌顿抑模型组（简称模型组）和空白组6组。各给药组按照一定药量,连续灌胃给药40天,1次/日,模型组和空白组以等容量的生理盐水灌胃,对各给药组及模型组制作大鼠心肌顿抑模型（结扎冠状动脉左前降支15min,空白组只穿线不结扎）,再灌注1小时后分别取血浆和心脏,采用ELISA法测量心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中CGRP的含量,所有数据采用单因素方差分析,P<0.05表示差异有统计学意义。结果 （1）再灌1h后,模型组与空白组比较,血浆中CGRP的含量增高,且具有明显统计学差异（P<0.01）;三味檀香汤散各剂量组及硝苯地平组与模型组比较,血浆中CGRP的含量明显增高,且具有统计学差异（P<0.05）。（2）再灌1h后,模型组与空白组相比较,心肌组织中CGRP的含量降低,且具有明显统计学差异（P<0.01）;三味檀香汤散各剂量组及硝苯地平组与模型组比较,心肌组织中CGRP的含量明显增高,且具有统计学差异（P<0.01）。结论 （1）三味檀香汤散可以明显升高心肌顿抑大鼠再灌1小时血浆及心肌组织中CGRP的含量,且具有明显的量效关系;（2）三味檀香汤散升高心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中CGRP的含量可能是其发挥保护和改善心肌顿抑作用的机制之一。
王元会[5]（2017）在《有氧运动对心肌缺血作用及机制研究》文中提出研究背景:心肌缺血是一组由各种原因导致冠状动脉血流量减少的疾病,发病率和致死率均较高,常见于冠状动脉粥样硬化性心脏病。虽然临床应用抗心绞痛药物和冠脉介入、搭桥等技术的推广大大提高了冠心病患者的生存率,但是心肌缺血的发生率仍然居高不下。心脏康复近年来日益被社会关注,逐渐成为临床及科研的研究热点。运动训练在心脏康复中占有重要地位。研究表明,运动训练可以通过提高急性心肌损伤早期线粒体生物合成的适应性变化改善能量代谢来发挥心脏的保护作用。运动训练还能改善心肌梗死后的左心室重构稳定患者的病情。但大强度运动易致心肌缺血发作,有潜在的心血管临床风险。有氧运动是一种较低强度的运动方式,可增强健康人的心肺功能,提高运动耐力。研究表明,有氧运动能提高心肌梗死患者的心功能、改善冠脉灌注及运动耐力,并且早期适当运动训练可有效提升心肌梗死患者心功能,其分子机制目前尚不完全清楚。已有研究发现有氧运动可以改善心肌组织结构、影响血小板活化、调节血管内皮功能、促进血管新生等作用。有研究表明运动和缺血促进了冠脉侧支循环形成,伴有血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的显着增加。人类出生后有两种形式的血管生长:血管生成（angiogenesis）和动脉生成（arteriogenesis）。血管生成是指毛细血管网络的形成。动脉生成是指预先存在的固有侧支动脉随着血管血流量及剪切力的增加,引起血管内皮细胞增殖,引起血管重塑,逐步形成大的有功能的侧支传导动脉的过程,所形成的动脉能够有效地恢复因血管阻塞所致的缺血区的血液供应,可以代偿因堵塞而失去功能的传导动脉血管。有氧运动对缺血心肌血管舒缩方面作用改善血运方面的作用机制研究尚未见报道。降钙素基因相关肽（Calcitonin gene-related peptide,CGRP）是一种由37个氨基酸组成的神经多肽,在神经系统及心血管系统中广泛分布,具有很强的扩血管活性,能扩张冠脉血管具有心脏保护作用。背根神经节是CGRP主要的合成部位,在背根神经节内含有大量的神经元胞体,其周围神经分布在心血管组织中。人类和鼠的CGRP有两种分子异构体:α-和β-CGRP,二者分子结构相似,具有相似的生物活性。除了强大的扩血管活性外,CGRP还具有保护内皮细胞、促进血管新生活性,即促进血管生成。有研究发现,等长收缩运动后骨骼肌中CGRP有显着增加。还有研究发现低氧条件下血浆CGRP降低,而运动可使血浆中CGRP升高,提示运动有可能通过CGRP途径保护缺血心肌减轻损伤。研究还发现内源性CGRP因其强大的扩血管活性和促血管生成活性促进了血管再形成,可以改善小鼠缺血后肢血供,其具体机制之一可能是CGRP与其受体结合激活了c AMP信号通路,增强了VEGF表达。本实验通过采用腹腔注射盐酸异丙肾上腺素制作大鼠心肌缺血模型,在4周长期游泳有氧运动后,观察心肌、血液中CGRP、背根神经节内CGRP m RNA（α-CGRP和β-CGRP）表达情况、缺血心肌侧支血管形成情况以及心功能情况,观察有氧运动在改善心肌缺血方面作用以及降钙素基因相关肽在此过程中的变化,进一步明确有氧运动在改善心肌缺血方面应用价值,并探讨机制,为临床冠心病患者运动康复提供实验依据。目的:利用大鼠心肌缺血模型,明确有氧运动对心肌缺血的作用及初步探讨其可能的分子机制:（1）观察有氧运动对心肌缺血的保护作用;（2）观察心肌缺血有氧运动后CGRP的变化;（3）探讨CGRP在有氧运动改善心肌缺血中的作用机制。方法:健康雄性Wistar大鼠180-220 g约21只,随机分为对照组（Control）、心肌缺血组（MI）、心肌缺血有氧运动组（MI+AE）3组,每组7只。心肌缺血组和心肌缺血有氧运动组采取腹腔一次性注射2 mg/kg盐酸异丙肾上腺素注射液（Iso）制作心肌缺血模型。在注射24小时后2组大鼠于麻醉下四肢针刺电极连接于心电图机做II导联心电图,筛选出心肌缺血大鼠。对照组腹腔注射等量生理盐水。对照组与心肌缺血组不进行有氧运动,常规安静笼内饲养4周。心肌缺血有氧运动组采用游泳有氧运动训练4周,每周5天,每天40分钟,其中第一周每天游泳时间从10分钟开始逐渐延长至40分钟,之后3周每天游泳40分钟。实验终点时,所有动物麻醉下完成心脏超声检测心功能:测量左心室收缩期末内径（left ventricular internal end-systolic diameter,LVIDs）、左心室舒张末期内径（left ventricular internal end-diastolic diameter,LVIDd）、射血分数（ejection fraction,EF）、短轴缩短率（fractional shortening,FS）等指标,所有检测指标均取5个心动周期的平均值。之后动物处死取材,标本包括血清、缺血心肌和背根神经节。三组标本进入实验室检测并将观测结果进行统计分析:酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测外周血、缺血心肌CGRP蛋白含量,逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测背根神经节中CGRP m RNA（α-CGRP和β-CGRP）表达,心肌HE染色镜下观察心肌缺血损伤情况,CD34因子免疫组化法标记血管内皮细胞镜下检测缺血心肌毛细血管密度。结果:1.注射盐酸异丙肾上腺素的大鼠均成功复制出心肌缺血模型。在4周游泳有氧运动训练后,MI+AE组体重（447.1±53.5 g）较MI组体重（420.0±43.2 g）有增加趋势（P=0.24）,两组与Control组（451.43±24.103）比较,差异均未达到统计学意义（P=0.85,P=0.18）。2.实验终点时,背根神经节MI组α-CGRP m RNA（0.358±0.031）、β-CGRP m RNA（0.345±0.022）和MI+AE组α-CGRP m RNA（0.504±0.038）、β-CGRP m RNA（0.41±0.019）表达水平均显着低于Control组（0.573±0.038,0.46±0.03,P<0.01）;MI+AE组α-CGRP m RNA、β-CGRP m RNA表达水平均显着高于MI组（P<0.01）。3.外周血清CGRP蛋白表达水平在MI+AE组（14.488±2.951 ng/ml,P<0.01）、MI组（10.319±3.414 ng/ml,P<0.01）均显着低于Control组（20.509±3.463 ng/ml）;且MI+AE组显着高于MI组（P<0.05）。心肌CGRP蛋白表达水平在MI+AE组（189.46±61.81 pg/ml,P<0.01）、MI组（99.87±32.3 pg/ml,P<0.05）显着低于Control组（255.04±66.83 pg/ml）;且MI+AE组显着高于MI组（P<0.01）。4.实验终点时,左心室心肌毛细血管（CD34因子染色阳性）密度MI+AE组（71.7±11.7 capillaries/mm2）显着高于MI组（50.1±5.7 capillaries/mm2,P<0.01）。MI组和MI+AE组心肌毛细血管密度显着低于Control组（139±19.6 capillaries/mm2,P<0.01）。5.左心室心肌HE染色后400倍高倍镜下观察,盐酸异丙肾上腺素注射后MI组心肌细胞损伤坏死改变较明显,而4周游泳有氧运动后MI+AE组心肌细胞损伤改变较轻。6.实验终点时各组超声心动图检测结果显示:（1）MI组左室收缩期内径LVIDs（6.18±1.2）、左室舒张期内径LVIDd（7.72±1.17）较Control组（3.55±0.86,4.85±1.31）均显着增加（P<0.01）;（2）MI组左室射血分数LVEF（48.29±6.09）、短轴缩短率FS（20.93±3.15）较Control组（71.39±6.46,34.23±3.97）均明显减小（P<0.01）;（3）MI+AE组左室收缩期内径LVIDs（4.6±0.47）、左室舒张期内径LVIDd（6.21±0.72）较Control组均显着增加（P<0.05）;（4）MI+AE组左室射血分数LVEF（64.19±3.83）、短轴缩短率FS（30.11±2.16）较Control组均明显减小（P<0.05）;（5）MI+AE组的EF、FS较MI组均显着增加（P<0.01）,MI+AE组的LVIDs（P<0.01）及LVIDd（P<0.05）较MI组显着降低。7.三组CGRP蛋白与心肌毛细血管密度及EF相关分析:Control组、MI组、MI+AE组三组心肌CGRP蛋白含量与心肌毛细血管密度呈显着正相关（r=0.904,P<0.01;r=0.839,P<0.05;r=0.855,P<0.05）。Control组、MI组、MI+AE组三组心肌CGRP蛋白含量与左心室射血分数EF成显着正相关（r=0.929,P<0.01;r=0.923,P<0.01;r=0.931,P<0.01）。上述结果表明,大鼠腹腔注射盐酸异丙肾上腺素后导致心肌缺血,外周血及心肌CGRP蛋白及背根神经节CGRP m RNA（α-CGRP m RNA和β-CGRP m RNA）均显着降低,心肌毛细血管密度及心功能也显着降低。4周游泳有氧运动可使CGRP蛋白及其m RNA水平显着提高、毛细血管密度和心功能均显着提高。CGRP的合成和分泌增加与心肌毛细血管密度增加、心功能改善具有显着相关性。结论:本实验在盐酸异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血模型上,4周游泳有氧运动可以改善心肌缺血,提高心功能,其机制可能通过CGRP介导的扩血管作用和血管生成途径,促进心肌侧支循环形成,保护了缺血心肌。CGRP在促进心肌缺血侧支循环形成过程中可能起到重要作用。有氧运动可诱导CGRP合成和释放增加,可用于冠心病患者辅助扩血管药物治疗,促进患者心脏康复,该方法具有安全、有效、经济等特点,临床应用价值较高,值得推广应用。
李欣,郑玉云,杨玉梅[6]（2016）在《降钙素基因相关肽对心肌顿抑的影响》文中研究说明心肌顿抑（MS）是心血管疾病发生、发展过程中的一个重要的环节,其发生机制复杂,存在多种学说,而降钙素基因相关肽（CGRP）由于其强大的心血管作用,必定对心肌顿抑也存在着某种影响,本文讨论了降钙素基因相关肽对心肌顿抑各个机制方面的影响,为心肌顿抑的防治提供新的思路和方法。
郑求烈[7]（2013）在《补充复合中药对运动大鼠心肌损伤标志物及CGRP含量的影响》文中进行了进一步梳理目的：CGRP在心肌细胞保护方面具有重要的作用。中药是中国的国粹,在体育界一直被作为重要的抗疲劳药物。本研究试图通过建立大强度训练训练模型,观察6周的递增负荷跑台训练和复方中药对大鼠心肌损伤标志物、CGRP及CGRP mRNA含量的影响,探求该中药复合物保护心肌的机制,以期为复合中药作为一种保护心肌、抗运动性疲劳的药物提供实验依据。方法：50只八周龄雄性SD大鼠,分为5组,每组10只；安静组（A组）、安静给药组（B组）、运动组（D组）、运动中剂量组（E组）、运动大剂量组（F组）。大鼠正常饲料喂养,B组和E组大鼠以中药浓度为0.1g/kg进行灌胃,F组大鼠以中药浓度为0.2g/kg进行灌胃,其它组大鼠灌胃等量的饮用水。各运动组进行6周的递增负荷训练。6周训练后即刻,大鼠腹腔麻醉,取血和心脏待测。比色法测量血清中心肌酶损伤标志酶的含量,比色法测定血清中抗氧化酶SOD、GSH-Px的含量,放射免疫分析法测定血清和心肌组织中CGRP的含量,采用RT-PCR检测心肌组织中CGRP mRNA的含量。结果：1.与A组相比,D组大鼠血清中ALT、LDH、a-HBDH非常显着性增高,CK显着性增高。与D组相比,E组大鼠血清中ALT、LDH非常显着降低,CK、a-HBDH显着降低,F组大鼠ALT、CK显着降低。与E组相比,F组大鼠血清中LDH显着增高,其它指标没有差异。2.各组大鼠之间血清SOD含量和GSH-Px含量均无显着性差异。3. CGRP含量变化：与A组相比D组大鼠血清中有升高的趋势,但无差异,心肌组织非常显着性降低。与D组相比E组大鼠血清中显着升高,心肌中无显着差异,F组血清中非常显着升高,心肌中显着降低。E、F组之间没有差异。4.心肌中α-CGRP mRNA表达量：与A组相比B组没有显着性变化,D组大鼠显着升高；与D组相比E组非常显着性降低,F组大鼠显着降低。结论：1.6周的递增负荷训练使大鼠血清心肌标志酶活性增加,心肌出现损伤。同时使心肌组织中CGRP含量降低,CGRP mRNA表达量显着升高。2.复合中药能够显着降低大强度训练引起的血清心肌标志酶活性,减轻大强度心率引起的心肌损伤程度；中药是通过增加血清中CGRP的含量来实现缓解大强度训练对心肌的损伤；但两种剂量之间的效果没有明显的差异。
孙振涛[8]（2012）在《降钙素基因相关肽基因导入对脑死亡大鼠的肺保护作用》文中认为脑死亡是指包括脑干在内的全脑机能丧失的不可逆性病理状态,脑死亡可导致肺损伤,肺损伤引起的氧合不足将直接影响到其他器官的功能和保护,探讨脑死亡肺损伤的机制,对预防和治疗脑死亡肺损伤具有重要意义。降钙素基因相关肽（Calcitonin gene-related peptide, CGRP）广泛存在于神经系统、血管、肺脏等多种组织中,是一种具有血管舒张、心肌正性变力变时、肺保护、脑保护以及免疫调节作用等多种生物学功能的多肽。研究发现颅脑损伤后机体内CGRP含量发生改变,并且和颅脑损伤的严重程度相关,但脑死亡后CGRP的含量改变和脑死亡肺损伤发生发展的关系尚不明确。基于“脑死亡后机体CGRP含量发生改变,进而参与了脑死亡后肺损伤的发生和发展”的假设。本实验拟首先采用缓慢间断颅内加压法建立大鼠脑死亡模型,然后采用放射免疫法,RT-PCR,免疫印迹（Western blot）等实验方法观察脑死亡不同时间点大鼠血浆CGRP及内皮素-1（Endothelin-1, ET-1）含量变化及肺组织中CGRP的mRNA水平及蛋白表达,分析其与脑死亡后肺损伤的关系,探讨CGRP在脑死亡后的变化规律及其对脑死亡后肺损伤的影响与机制,为脑死亡后肺损伤的预防和治疗提供思路。进而在建立脑死亡模型时静脉给予外源性CGRP,采用放射免疫法,酶联免疫吸附实验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA）, RT-PCR, Western blot,免疫组织化学等实验方法观察CGRP对脑死亡大鼠血浆肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β, IL-1β）、白细胞介素-6（Interleukine-6, IL-6）等炎症因子水平及肺组织中丙二醛（Malondialdehyde, MDA）含量和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）活性的影响及对肺组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（y-glutamylcysteine Synthetase,γ-GCS）、水通道蛋白-1 （Aquaporin Protein-1, AQP-1）、CGRP的mRNA水平及蛋白表达的影响。同时观察静脉给予外源性CGRP后对肺组织形态的影响,探讨CGRP的肺保护作用及其可能机制。因为外源性CGRP在体内迅速灭活,代谢快、作用时间短,而构建CGRP重组腺病毒载体气管导入具有不整合入宿主细胞基因组,安全方便,作用时间长等优点,理论上可对脑死亡肺损伤起到更好的保护作用。所以,拟在以上实验的基础上,通过气管导入带有增强型绿色荧光蛋白标记的降钙素基因相关肽重组腺病毒载体（Ad5-CGRP-EGFP）,然后观察CGRP基因转染后大鼠肺组织CGRP mRNA水平和蛋白表达水平及CGRP基因治疗对肺组织γ-GCS, AQP-1等mRNA水平和蛋白表达的影响,对肺组织MDA含量、SOD活力,肺水含量、肺组织结构的影响,以及对血浆TNF-α、IL-1β、IL-6含量的影响,并探讨CGRP基因治疗在脑死亡大鼠肺保护中的作用及机制。本研究拟观察脑死亡后CGRP的变化规律及其和脑死亡肺损伤的关系,并通过CGRP基因导入观察CGRP基因治疗对脑死亡大鼠的肺保护作用并探讨其可能机制,为脑死亡肺损伤的预防及基因靶向治疗提供理论依据。本研究共分以下3个部分。第一部分脑死亡大鼠CGRP表达变化与脑死亡肺损伤1方法1.1健康Wistar大鼠20只,雌雄不限,体重250-300g,SPF级,将动物随机分为2组,即对照组（A组）、脑死亡组（B组）,每组10只。B组麻醉后行股动脉股静脉插管、气管插管及颅骨钻孔置管,硬脑膜外导管颅内缓慢加压建立脑死亡模型；A组麻醉后操作同B组,但不行硬脑膜外导管颅内加压。分别在麻醉后15min（T0）、脑死亡即刻（T1）、脑死亡2h时点（T2）、脑死亡6h时点（T3）、脑死亡12h时点（T4）留取血液标本并于脑死亡12h时点留取肺组织标本。1.2采用放射免疫法分别检测不同时点血浆CGRP、ET-1含量变化。脑死亡12h时点留取肺组织,测定肺系数和肺水含量,苏木素-伊红（HE）染色观察肺脏组织结构变化。RT-PCR方法检测肺组织中CGRP mRNA; Western blot方法测肺组织CGRP蛋白。1.3统计学处理：所有数值变异均采用均数±标准差（X±s）表示,应用SPSS 16.0统计分析软件,采用重复测量数据的方差分析、单因素方差分析等分析方法进行统计学处理,显着性检验水准取α=0.05。2结果2.1血压和心率变化：A组在整个实验过程中血压和心率无明显变化（P>0.05）；B组在颅内加压过程中血压增高,心率先慢后快,B组血压在T1及以后各时点较T0时点低,B组心率在T1及以后各时点较组内T0时点快,（P<0.05）。B组在峰值时点血压增高、心率增快,在T1及以后各时点B组血压较A组低,心率较A组快,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.2血浆CGRP变化：A组在T1时点CGRP含量较TO时点增高,在T2时点CGRP含量较脑死亡时点降低（P<0.05）,T2时点以后CGRP含量恢复正常；B组在T1时点CGRP含量较T0时点增高,T1后各时点CGRP含量与T0时点比较均降低,T4时点较T3时点CGRP含量有所回升,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）。B组T1时点CGRP含量较A组增高,T1后各时点CGRP含量均较A组降低,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.3血浆ET-1变化：A组在T1时点及T2、T3时点ET-1含量较TO时点增高（P<0.05）,T4时点恢复正常；B组T1后各时点ET-1含量与T0时点比较均增高,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）。B组T1后各时点ET-1含量均较A组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.4肺组织CGRP mRNA水平比较B组较A组升高,肺组织CGRP蛋白表达水平B组较A组降低,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.5脑死亡大鼠肺组织常规结构变化：HE染色结果显示A组肺脏组织结构基本正常：B组出现损伤性改变。2.6肺系数及肺水含量B组均较A组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。第二部分外源性CGRP对脑死亡大鼠肺损伤的影响及其机制1方法1.1健康Wistar大鼠75只,雌雄不限,体重250-300g,SPF级,将动物随机分为三组,每组25只,即对照组（A组）、脑死亡组（B组）、CGRP干预组（C组）。B、C组建立脑死亡模型；A组除不行硬脑膜外导管加压外,其余处理同脑死亡组；C组为CGRP干预的脑死亡组,于脑死亡模型建立成功后经静脉用微量输注泵给予CGRP3μg/kg,随后给与CGRP 6μg/kg持续输注维持12h。分别于麻醉后15min（TO）、脑死亡即刻（T1）、脑死亡2h时点（T2）、脑死亡6h时点（T3）、脑死亡12h时点（T4）每组随机选5只共15只大鼠抽取血液标本并取肺标本。1.2采用ELISA法测定各时点血浆TNF-α、IL-1β、IL-6含量；采用放射免疫法分别检测各时点血浆CGRP、ET-1含量变化；T4时点留取肺组织,硫代巴比妥钠法测定肺匀浆中MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定肺组织中SOD活性,分析天平测定肺系数和肺水含量,HE染色观察肺脏组织结构变化；RT-PCR方法检测T1、T3、T4时点肺组织中γ-GCS、AQP-1、CGRPmRNA; Western blot方法测T1、T3、T4时点肺组织γ-GCS、AQP-1、CGRP蛋白表达。1.3统计学处理：所有数值变异均采用均数±标准差（X±s）表示,应用SPSS 16.0统计分析软件,采用重复测量数据方差分析、单因素方差分析等进行统计学处理,显着性检验水准取α=0.05。2结果2.1血压和心率变化：A组在整个实验过程中血压和心率无明显变化（P<0.05）；B组、C组在颅内加压过程中血压增高,心率增快,B组、C组血压在T1及以后各时点较T0时点低,B组、C组心率在T1及以后各时点较组内TO时点快,（P<0.05）。B组、C组在峰值时点血压增高、心率增快,在T1及以后各时点B组、C组血压较A组低,心率较A组快,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.2血浆TNF-α变化：A组各时点TNF-α水平差异无统计学意义；B组、C组TNF-α水平自T2开始逐渐升高,每后一时间点与前一时间点相比差异有统计学意义（P<0.05）。TNF-α水平自T2时点开始,C组高于A组,B组高于C组和A组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.3血浆IL-1p变化：A组各时点IL-1p水平差异无统计学意义；B组、C组IL-1p水平自T2开始逐渐升高,每后一时间点与前一时间点相比差异有统计学意义（P<0.05）。IL-18水平自T2时点开始,C组高于A组,B组高于C组和A组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.4血浆IL-6变化：A组IL-6水平T2、T3、T4时点升高与T0、T1时间点比较差异有统计学意义（P<0.05）；B组、C组IL-6水平自T2开始逐渐升高,每后一时间点与前一时间点相比差异有统计学意义（P<0.05）。IL-6水平自T2时点开始,C组高于A组,B组高于C组和A组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.5血浆CGRP变化：A组在T1时点CGRP含量较T0时点增高,在T2时点CGRP含量较T1时点降低,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）,T2时点以后CGRP含量恢复正常；B组CGRP含量在T1时点较T0时点增高,T1后各时点与TO时点比较均降低,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）；C组CGRP含量在T1后各时点与T0时点比较均增高,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）。B组CGRP含量T1时点较A组增高,T2后各时点均较A组降低,C组CGRP含量T1以后各时点较A组增高,T2后各时点均较B组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.6血浆ET-1变化：A组ET-1含量在T1时点及T2时点较T0时点增高（P<0.05）,T3时点以后恢复正常,B组ET-1含量T1后各时点与T0时点比较均增高,C组ET-1含量T1后各时点与TO时点比较均增高,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）。B组、C组T1后各时点ET-1含量均较A组增高, C组T2后各时点ET-1含量均较B组减低,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.7肺组织MDA含量及SOD活性：肺组织中MDA含量B组高于A组及C组,C组高于A组（P<0.05）,肺组织SOD活性B组低于A组及C组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.8肺组织γ-GCS mRNA水平B组、C组均较A组升高,C组较B组升高（P<0.05）。肺组织AQP-1 mRNA水平B组较A组降低,C组较B组、A组增高（P<0.05）。CGRP mRNA水平B组较A组升高,C组较A组降低（P<0.05）。肺组织γ-GCS、AQP-1、CGRP蛋白水平均B组较A组降低,C组较B组、A组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.9脑死亡大鼠肺组织常规结构变化：HE染色结果显示A组肺脏组织结构基本正常；B组出现损伤性改变,C组出现损伤性改变较组B减轻。2.10肺系数及肺水含量B组均较A组增高,C组肺系数及肺水含量也较A组增高,但较B组降低,3组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。第三部分CGRP基因导入对脑死亡大鼠肺损伤的影响1方法1.1 Wistar大鼠50只,雌雄不限,体重250-300g,SPF级,随机分为5组,每组10只,即对照组（A组）、脑死亡组（B组）、脑死亡CGRP干预组（C组）、脑死亡空载体导入组（D组）、脑死亡CGRP基因治疗组（E组）。B组、C组、D组、E组均建立脑死亡模型；A组开颅等处理均同脑死亡组,但不行硬脑膜外导管加压。C组为CGRP干预的脑死亡组,脑死亡模型建立后经静脉用微量输注泵给予CGRP3μg/kg,随后给与CGRP 6μg/kg持续输注维持12h；D组于脑死亡模型建立后微量输注泵给予CGRP3μg/kg,同时通过气管导入空载体；E组于脑死亡模型建立后微量输注泵给予CGRP3μg/kg同时通过气管导入携带增强型绿色荧光蛋白标记的降钙素基因相关肽重组腺病毒载体（Ad5-CGRP-EGFP）。分别在麻醉后15min（T0）、脑死亡12h时点（T1）抽取血液标本,在脑死亡12h或对照组12h时点取材肺组织标本。1.2采用ELISA方法测定各时点血浆TNF-αIL-1β, IL-6水平；采用放射免疫法分别检测各时点血浆CGRP、ET-1含量；T1时点留取肺组织,荧光显微镜下检测基因转染情况,硫代巴比妥钠法测定肺匀浆中MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定肺组织中SOD活性；分析天平测定肺系数和肺水含量,HE染色观察肺脏组织结构变化,免疫组化检测肺组织γ-GCS, AQP-1蛋白表达；RT-PCR方法检测肺组织中γ-GCS、AQP-1 CGRP mRNA; Western blot方法测肺组织γ-GCS、AQP-1、CGRP蛋白表达。1.3统计学处理：所有数值变异均采用均数±标准差（X±s）表示,应用SPSS 16.0统计分析软件,采用重复测量数据的方差分析、单因素方差分析等统计学方法进行统计学处理,显着性检验水准取a=0.05。2结果2.1 A组、B组、C组未见绿色荧光反应,D组、E组肺组织标本在荧光显微镜下呈较强的绿色荧光反应,证明基因转染成功。2.2血压和心率变化：A组在整个实验过程中血压和心率无明显变化（P>0.05）；B组、C组、D组、E组在颅内加压过程中血压增高,心率增快,B组、C组、D组、E组血压在脑死亡时点及以后各时点较TO时点低,B组、C组、D组、E组心率在脑死亡及以后各时点较组内TO时点快,（P<0.05）。B组、C组、D组、E组在峰值时点血压增高、心率增快,在脑死亡时点及以后各时点B组、C组、D组、E组血压较A组低,心率较A组快,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.3血浆TNF-α、IL-1β、IL-6水平：T0时点各组TNF-α、IL-1β、IL-6水平差异无统计学意义。T1时点TNF-α、IL-1β、IL-6水平B组、D组高于E组、C组和A组,E组、C组高于A组,C组高于E组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.4血浆CGRP含量：T0时点各组血浆CGRP水平差异无统计学意义。T1时点E组血浆CGRP水平高于D组、C组、B组和A组,C组高于D组、B组和A组,A组高于D组和B组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.5血浆ET-1含量：T0时点各组血浆ET-1水平差异无统计学意义。T1时点E组低于D组、C组、B组和A组,C组低于D组、B组和A组,A组低于D组和B组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）；2.6肺组织MDA含量及SOD活性：肺组织中MDA含量B组、D组高于A组、C组和E组,C组高于E组和A组,E组高于A组（P<0.05）,肺组织SOD活性C组、E组高于A组、B组和D组,E组高于C组（P<0.05）。2.7肺组织γ-GCS mRNA水平B组、C组、D组、E组均较A组升高,C组较B组、D组升高,E组较C组升高（P<0.05）。肺组织AQP-1 mRNA水平B组、D组较A组低,C组、E组较A组高,E组较C组高（P<0.05）。肺组织CGRP mRNA水平B组、D组、E组较A组升高,C组较A组降低,E组较B组、D组高（P<0.05）。肺组织γ-GCS、AQP-1 CGRP蛋白表达水平均B组、D组较A组降低,C组、E组较A组高,E组较C组高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.8肺组织γ-GCS、AQP-1免疫组化结果：γ-GCS、AQP-1蛋白表达B组、D组均较E组、C组和A组降低,E组、C组较A组增高,E组较C组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.9脑死亡大鼠肺组织常规结构变化：HE染色结果显示A组肺脏组织结构基本正常；B组、D组出现损伤性改变,C组出现损伤性改变较B组、D组减轻,E组损伤性改变较C组轻。2.10肺系数及肺水含量：B组、D组均较E组、C组和A组高,E组、C组较A组高,E组较C组低,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论1、脑死亡大鼠血浆及肺组织CGRP含量下降,脑死亡后肺损伤和机体CGRP水平下降,TNF-α、IL-1β、IL-6等促炎因的释放增加,氧化应激增强,AQP-1表达下降等有关。2、外源性CGRP对脑死亡大鼠肺组织具有保护作用。3、CGRP基因转染脑死亡大鼠较静脉应用外源性CGRP血浆TNF-αIL-1βIL-6含量下降,肺组织MDA水平下降、SOD活力增高、AQP-1,γ-GCSmRNA和蛋白表达增加。4、CGRP基因转染较静脉应用CGRP对脑死亡大鼠具有更好的肺保护作用,其机制与降低炎症反应,抗氧化应激,增加AQP-1的表达有关。
佟长青,赵娟,李海英,薄海[9]（2010）在《低氧及跑台运动对大鼠内皮素和降钙素基因相关肽的影响》文中指出目的:观察低压低氧和跑台训练对大鼠血浆内皮素和降钙素基因相关肽的影响,为高原低氧训练适应的习服提供实验数据。方法:40只雄性SD大鼠随机分为常氧对照组、常氧运动组、低氧对照组、低氧运动组。用MPA-心功能分析系统记录血压和心率,用放射免疫法测血浆和心肌匀浆中内皮素和降钙素基因相关肽。结果:①与常氧对照组比较,常氧运动组体重减少（P<0.05）,血浆中的内皮素（ET）降低（P<0.05）,血浆中和心肌匀浆中降钙素基因相关肽（CGRP）升高（P<0.001,P<0.01）;②与低氧对照组比较,低氧运动组体重减少（P<0.01）,血浆中的ET降低（P<0.01）,CGRP的差异不显着;③与常氧运动组比较,低氧运动组心肌匀浆中的ET降低（P<0.05）,血浆中的CGRP也降低（P<0.001）。结论:运动使血浆中的ET降低,CGRP升高;低氧使血浆中的ET升高,CGRP降低;低氧和运动双重刺激使心肌匀浆中的ET和血浆中的CGRP降低。
李宏伟[10]（2009）在《肾上腺髓质素介导运动预适应心肌细胞保护作用及其机制的研究》文中研究指明研究目的:反复短暂的心肌缺血/再灌注可使心肌在随后持续性缺血中得到保护的现象,称为缺血预适应（ischemic prenconditioning,IP）,IP是心肌的一种内源性保护机制。多次短暂的大强度运动诱导心肌相对缺血/再灌注也可对心肌产生IP样的保护作用,称为运动预适应（exercixe prenconditioning,EP）,EP是IP的一种特殊形式。研究表明,IP和EP的保护作用都与诱导内源性保护物质的产生有关。肾上腺髓质素（Adrenomedullin,ADM）是新发现的重要的心脏内源性保护物质,心脏产生这种物质;ADM对心脏的直接保护作用;特异性阻滞剂可阻断ADM的保护作用;外源性给予ADM可产生心脏保护作用;运动可诱导ADM的产生和释放。EP是有效的心脏保护措施,ADM是重要的心脏内源性保护物质,运动可诱导ADM的产生,EP的心脏保护作用是否是通过ADM,其保护作用的机制是什么,长期和短期EP的保护效果及其机制有什么不同,目前国内外还没有报道。因此,本研究在建立短期和长期EP模型的基础上,探讨ADM介导EP心脏保护作用及其机制,为EP心脏保护作用及其机制的研究提供新的理论和实验依据。研究方法:本研究采用雄性SD大鼠90只,随机分为对照组（C组）,异丙肾上腺素组（isoprenaline,ISO组）,3天（短期）运动预适应组（3dEP组）,3周（长期）运动预适应组（3wEP组）,3天运动预适应+异丙肾上腺素组（3dEP+ISO组）,3周运动预适应+异丙肾上腺素组（3wEP+ISO组）。3dEP组、3dEP+ISO组和3wEP组、3wEP+ISO组分别进行连续3天和3周的间歇跑台训练建立3天和3周EP动物模型。在最后一次运动结束后30min,3dEP+ISO组和3wEP+ISO组通过腹腔注射大剂量ISO,ISO组同时腹腔注射等量ISO,复制大鼠心肌缺血损伤模型。采用免疫化学发光法检测血清心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）的含量;用HE染色法观察心肌组织形态结构改变;用苏木素碱性复红苦味酸染色法（haematoxylin basie fuchsin picric,HBFP染色）观察心肌缺血缺氧改变;用透射电镜观察心肌细胞超微结构改变;用酶联免疫法检测血清和心肌ADM的含量;应用原位杂交技术显示心肌细胞ADM mRNA的定位表达;用免疫组织化学法显示心肌、冠状血管ADM的分布与表达;用计算机图像分析技术对心肌细胞的ADM mRNA,心肌组织、冠状血管ADM进行定量分析。研究结果:（1）ISO组血清cTnI含量明显高于C组（p<0.05）;3dEP组和3wEP组血清cTnI含量与C组相比,差异均不具有显着性;3dEP+ISO组血清cTnI含量明显高于C组（p<0.05）,但明显低于ISO组（p<0.05）;3wEP+ISO组血清cTnI含量与C组相比,差异不具有显着性,但明显低于ISO组（p<0.05）。（2）C组、3dEP组和3wEP组心肌纤维形态结构正常,无红色缺血缺氧改变;ISO组心肌纤维有大量的片状红色缺血缺氧改变;3dEP+ISO组和3wEP+ISO组心肌纤维有少量点状红色缺血缺氧改变。（3）与C组比较,3dEP组和3wEP组血清ADM含量无显着变化。（4）C组、3dEP组和3wEP组心肌细胞超微结构正常;ISO组心肌细胞超微结构出现严重损伤;3dEP+ISO组和3wEP+ISO组心肌细胞超微结构损伤明显没有ISO组严重。（5）C组心肌细胞中ADM mRNA的原位杂交信号位于胞浆内,呈棕黄色。3dEP组原位杂交信号与C组相比没有明显差异;3wEP组原位杂交信号强于C组。计算机图像分析表明,3wEP组ADM mRNA原位杂交信号的阳性表达面积和平均光密度明显高于C组（p<0.05）。C组冠状血管中ADM mRNA的原位杂交信号位于冠状血管壁内,呈棕黑色。3dEP组原位杂交信号与C组相比没有明显差异;3wEP组原位杂交信号弱于C组。计算机图像分析表明,3wEP组ADM mRNA原位杂交信号的阳性表达面积和平均光密度明显低于C组（p<0.05）。（6）C组心肌ADM免疫反应阳性呈棕褐色,在心肌胞浆中呈低强度分布,在冠状血管呈高强度分布。计算机图像分析表明,3wEP组ADM在心肌阳性表达面积和平均光密度明显高于3dEP组和C组（p<0.05）,在冠状血管ADM阳性表达面积和平均光密度明显明显低于3dEP组和C组（p<0.05）。（7）3dEP组心肌ADM含量与C组相比,差异不具有显着性;3wEP组心肌ADM含量明显高于C组（p<0.05）。研究结论:（1）用连续3d和3w间歇运动诱导IP效应的方法可以建立短期和长期EP动物模型。血清cTnI含量、心肌组织缺血缺氧改变和心肌细胞超微结构改变,显示了EP的心肌细胞保护作用。（2）长期EP使心肌细胞ADM mRNA表达增加,表明长期EP促进了ADM在心肌的合成,即其调节可能主要在转录水平。（3）长期EP使心肌ADM总的含量增加,其中心肌细胞ADM蛋白表达增加,而冠状血管内皮细胞和平滑肌细胞ADM蛋白表达减少,血清ADM含量未发生变化,提示长期EP引起的相对缺氧和心肌收缩能力增强可能引起心肌ADM的表达增加,心肌细胞与冠状血管内皮细胞和平滑肌细胞分泌的ADM,通过自分泌和旁分泌的方式发挥作用。（4）长期EP使心肌组织ADM增加,其维持心肌局部血流动力学的稳定及其抗氧化作用可能是长期EP对ISO致心肌损伤的保护机制之一。（5）短期EP没有使心肌ADM发生改变,ADM与短期运动预适应之间的关系还有待进一步研究。
二、大鼠心肌顿抑时血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量的变化（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、大鼠心肌顿抑时血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量的变化（论文提纲范文）
（1）基于mTORC1-ULK1-FUNDC1通路的电针预处理减轻MIRI的线粒体自噬机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.中医学对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的认识 |
| 1.1 MIRI的中医学病名与病因病机 |
| 1.2 针灸“治未病”理论与“心痛” |
| 1.3 MIRI的中医证治概要 |
| 2.现代医学对MIRI的认识 |
| 2.1 流行病学 |
| 2.2 MIRI概述 |
| 2.3 MIRI的发病因素 |
| 2.4 MIRI的发生机制 |
| 3.MIRI的临床表现和治疗概况 |
| 3.1 MIRI的临床表现 |
| 3.2 西医治疗概况 |
| 3.3 中药治疗概况 |
| 4.针灸“治未病”与MIRI防治的研究现状 |
| 4.1 针灸预处理抗MIRI的用穴与电针刺激参数 |
| 4.2 针灸预处理调控MIRI自噬的研究现状 |
| 5.线粒体自噬在MIRI中的作用 |
| 5.1 线粒体自噬的概述 |
| 5.2 线粒体自噬在MIRI中的研究现状 |
| 5.3 mTORC1-ULK1-FUNDC1信号通路与线粒体自噬 |
| 6.EAP调控mTORC1、ULK1蛋白的研究现状 |
| 第二部分 实验研究 |
| 技术路线图 |
| 实验一 不同电流强度EAP对MIRI的效应差异研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要实验仪器与耗材 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 实验动物分组与干预 |
| 2.2 电针预处理操作方法 |
| 2.3 MIRI模型制作与评价 |
| 2.4 室性心律失常评分(VAS) |
| 2.5 心脏Evans blue-TTC染色及心肌IS%、Risk size的计算 |
| 2.6 血清心肌酶谱指标检测 |
| 2.7 统计学处理 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 不同电流强度EAP对各组大鼠体重及MIRI大鼠术后生存曲线的影响 |
| 3.2 不同电流强度EAP对各组大鼠心律失常、心梗面积比与风险面积比及血清酶谱的影响 |
| 实验二 EAP对MIRI大鼠线粒体自噬的调控效应研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要实验仪器与耗材 |
| 2、实验方法 |
| 2.1 实验动物分组与干预 |
| 2.2 电针预处理方法 |
| 2.3 MIRI模型制作与评价 |
| 2.4 室性心律失常评分(VAS) |
| 2.5 心脏Evans blue-TTC染色及心肌IS%、Rize size的计算 |
| 2.6 血清心肌酶谱指标检测 |
| 2.7 TUNEL染色 |
| 2.8 自噬小体的检测 |
| 2.9 免疫荧光染色(IF) |
| 2.10 石蜡切片免疫组化染色(IHC) |
| 2.11 mTORC1、ULK1、FUNDC1蛋白检测 |
| 2.12 统计学处理 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 EAP对各组大鼠体重及MIRI术后生存曲线的影响 |
| 3.2 EAP对各组大鼠ECG、VAS、IS%及Risk size的影响 |
| 3.3 EAP可减少MIRI诱导的心肌损伤标志物和细胞凋亡 |
| 3.4 EAP减弱了MIRI诱导的线粒体自噬 |
| 3.5 EAP调节mTORC1,ULK1和FUNDC1的表达 |
| 实验三 EAP减轻MIRI大鼠线粒体自噬的mTORC1-ULK1-FUNDC1信号机制研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要实验仪器与耗材 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 实验动物分组与干预 |
| 2.2 电针预处理操作方法 |
| 2.3 MIRI模型制作与评价 |
| 2.4 雷帕霉素的配制 |
| 2.5 室性心律失常评分(VAS) |
| 2.6 心脏Evans blue-TTC染色及心肌IS%、Rize size的计算 |
| 2.7 血清心肌酶谱指标检测 |
| 2.8 TUNEL染色 |
| 2.9 自噬小体的检测 |
| 2.10 免疫荧光染色(IF) |
| 2.11 石蜡切片免疫组化染色(IHC) |
| 2.12 心肌组织线粒体的分离提取 |
| 2.13 mTORC1-ULK1-FUNDC1通路蛋白检测 |
| 2.14 ATP水平的检测 |
| 2.15 统计学处理 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 雷帕霉素阻断了EAP的心脏保护作用 |
| 3.2 雷帕霉素减弱EAP抑制的线粒体自噬 |
| 3.3 EAP通过mTORC1-ULK1-FUNDC1途径抑制线粒体自噬 |
| 第三部分 讨论 |
| 1.MIRI实验模型的制作与评价 |
| 2.电针预处理PC6的选择依据 |
| 2.1 PC6的现代研究 |
| 2.2 PC6穴名解析 |
| 2.3 PC6的特异性 |
| 2.4 心脏与心包经的联系 |
| 2.5 电针预处理的选择依据 |
| 3.电针预处理刺激强度的选择 |
| 4.MIRI防治与针灸预处理 |
| 5.mTORC1与MIRI线粒体自噬及电针预处理的干预作用 |
| 6.电针预处理减轻MIRI的mTORC1-ULK1-FUNDC1信号机制 |
| 第四部分 结论 |
| 论文创新点 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录一: 英文缩略词一览表 |
| 攻读博士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）大鼠心肌缺血再灌注损伤后脊髓代谢物变化 ——基于NMR的代谢组学分析（论文提纲范文）
| 缩略词(Abbreviations) |
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 脊髓与心肌缺血再灌注损伤 |
| 1.2 NMR代谢组学概述 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要实验试剂 |
| 2.3 主要仪器设备 |
| 2.4 主要试剂配方 |
| 3 研究方法 |
| 3.1 制作大鼠心肌缺血再灌注损伤模型 |
| 3.2 心肌缺血再灌注损伤模型评价方法 |
| 3.3 分子生物学实验方法 |
| 3.4 ~1 HMRS代谢组学样品的制备 |
| 3.5 ~1 HMRS原始数据的采集 |
| 3.6 ~1 HMRS原始数据的处理 |
| 3.7 数据统计分析和处理方法 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 心肌缺血再灌注模型的评价 |
| 4.2 分子生物学结果 |
| 4.3 ~1 HMRS代谢谱图 |
| 4.4 各代谢物的绝对浓度 |
| 4.5 代谢物的比值 |
| 5 讨论 |
| 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 心肌保护的中枢神经机制 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1 (攻读学位期间发表论文目录) |
| 附录2 |
| 致谢 |
（3）运动预处理对老龄大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 现代医学对冠心病的认识 |
| 1.1 流行病学 |
| 1.2 病理生理机制 |
| 2 心肌缺血/再灌注损伤与自噬 |
| 2.1 自噬的发生过程 |
| 2.2 多种信号通路调控自噬 |
| 2.3 心肌缺血再灌注损伤与Beclin1、Atg-5 蛋白 |
| 3 运动预处理 |
| 3.1 运动预处理相关研究 |
| 3.2 运动预处理的心脏保护相关机制 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 指标检测及方法 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 实验大鼠的情况 |
| 2.2 各组大鼠心功能的差异 |
| 2.3 各组大鼠心肌梗死面积(IS%) |
| 2.4 各组大鼠心肌细胞超微结构与自噬体的形成 |
| 2.5 各组大鼠心肌Beclin1、Atg-5 蛋白表达 |
| 讨论 |
| 1 离体心脏Langendorff缺血/再灌注模型的制备及影响模型制备的因素 |
| 1.1 老龄大鼠离体心脏MIRI模型的制备 |
| 1.2 影响模型制备的主要因素 |
| 2 运动预处理方案的选择 |
| 3 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心功能的影响 |
| 4 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心肌梗死面积的影响 |
| 5 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心肌细胞超微结构与自噬体的形成的影响 |
| 6 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心肌Beclin1、Atg-5 蛋白表达的影响 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 个人简历 |
（4）三味檀香汤散对心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量影响的研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.1 主要仪器 |
| 1.1.2 主要药物与试剂 |
| 1.1.3 试验动物 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 动物分组及给药 |
| 1.2.2 大鼠心肌顿抑模型的建立 |
| 1.2.3 血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽的测定 |
| 1.2.3. 1 样品收集 |
| 1.2.3. 2 降钙素基因相关肽的测定 |
| 1.2.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 三味檀香汤散对心肌顿抑大鼠血浆中CGRP含量的影响 |
| 2.3 三味檀香汤散对心肌顿抑大鼠心肌组织中CGRP含量的影响 |
| 3 讨论 |
（5）有氧运动对心肌缺血作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 实验材料 |
| 1.1 实验药品与试剂 |
| 1.1.1 主要常用药物及试剂 |
| 1.1.2 免疫组化主要试剂 |
| 1.1.3 RT-PCR主要试剂 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 实验动物 |
| 第二章 实验项目及方法 |
| 2.1 心肌缺血模型大鼠制备 |
| 2.2 有氧运动方案 |
| 2.3 实验动物分组 |
| 2.4 超声心动仪检测心功能 |
| 2.5 血清及组织标本的收集 |
| 2.6 ELISA方法检测血液和心肌中CGRP蛋白浓度 |
| 2.7 逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)背根神经节CGRP m RNA检测 |
| 2.8 组织学检查及毛细血管计数 |
| 2.9 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 一般情况 |
| 3.2 有氧运动对背根神经节α、β-CGRP mRNA表达水平的影响 |
| 3.3 有氧运动对外周血和心肌CGRP水平的影响 |
| 3.4 有氧运动对心肌缺血损伤影响组织学观察 |
| 3.5 有氧运动对心肌毛细血管的影响 |
| 3.6 有氧运动对心功能的影响 |
| 3.7 心肌中CGRP与心肌毛细血管密度、EF的相关性 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 冠心病的治疗策略及研究 |
| 4.2 运动与冠心病 |
| 4.3 侧支循环形成方式及临床意义 |
| 4.4 CGRP的生物活性及作用机制 |
| 4.5 本研究假设及实验结果 |
| 4.6 本课题研究局限及下一步工作计划 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
（6）降钙素基因相关肽对心肌顿抑的影响（论文提纲范文）
| 1 MS的定义和发生机制 |
| 2 CGRP的概念 |
| 3 CGRP对MS的影响 |
| 3.1 对钙学说的影响 |
| 3.2 对氧自由基学说的影响 |
| 3.3 对能量代谢学说的影响 |
| 3.4 对微血管学说的影响 |
| 3.5 对基因层面的影响 |
| 4 结语 |
（7）补充复合中药对运动大鼠心肌损伤标志物及CGRP含量的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 前言 |
| 2 文献综述 |
| 2.1 心肌损伤及运动性心肌损伤 |
| 2.2 常用血液心肌损伤标志物 |
| 2.3 运动对血清心肌酶活性的影响及其机制 |
| 2.3.1 运动对血清心肌酶活性的影响 |
| 2.3.1.1 运动对AST及其同工酶活性的影响 |
| 2.3.1.2 运动对CK及其同工酶活性的影响 |
| 2.3.1.3 运动对LDH及其同工酶活性的影响 |
| 2.3.2 运动引起血清心肌酶活性增高的机制 |
| 2.4 中药对心肌酶的影响 |
| 2.5 降钙素基因相关肽(CGRP)的基本特性 |
| 2.5.1 CGRP的结构特性 |
| 2.5.2 CGRP的分布和受体 |
| 2.5.3 CGRP的合成、释放和降解 |
| 2.5.4 CGRP的生物学作用 |
| 2.6 运动与CGRP的关系 |
| 2.6.1 CGRP对运动训练的影响 |
| 2.6.1.1 CGRP与运动性心脏 |
| 2.6.1.2 CGRP对心率的作用 |
| 2.6.1.3 CGRP对心肌收缩力的影响 |
| 2.6.1.4 CGRP对骨骼肌的作用 |
| 2.6.1.5 CGRP的血流动力学作用 |
| 2.6.1.6 CGRP对血压的影响 |
| 2.6.1.7 CGRP对心肌细胞和内皮细胞的保护作用 |
| 2.6.1.8 CGRP的心血管调节机制 |
| 2.6.2 调节心脏CGRP释放的因素 |
| 2.6.3 运动训练对CGRP的影响 |
| 2.6.3.1 一次性运动训练对CGRP含量的影响 |
| 2.6.3.2 长时间的运动训练对CGRP含量的影响 |
| 2.6.3.3 运动中刺激CGRP含量变化的因素 |
| 2.6.4 CGRP发挥作用可能与之相关的物质 |
| 2.6.4.1 CGRP与NO的关系 |
| 2.6.4.2 CGRP与抗氧化酶的关系 |
| 2.6.5 运动过程中CGRP保护心血管的机制 |
| 2.7 CGRP与运动性疲劳的关系 |
| 2.8 运动界常用中药的作用及对CGRP的影响 |
| 2.9 中药对CGRP含量的影响 |
| 3 研究对象与方法 |
| 3.1 实验对象与分组 |
| 3.1.1 分组和运动干预 |
| 3.1.2 给药方案 |
| 3.1.3 运动方案 |
| 3.2 宰杀取材 |
| 3.3 实验所用试剂和仪器 |
| 3.3.1 实验用药 |
| 3.3.2 实验所用主要试剂和试剂盒 |
| 3.3.3 主要实验仪器 |
| 3.4 测试指标和方法 |
| 3.4.1 血清心肌损伤标志物的测定 |
| 3.4.2 血清抗氧化酶的测定 |
| 3.4.3 血清和心肌组织中降钙素基因相关肽(CGRP)的测定 |
| 3.4.4 心肌组织中CGRP mRNA的含量 |
| 3.4.4.1 引物设计合成 |
| 3.4.4.2 RNA提取和质检 |
| 3.4.4.3 逆转录 |
| 3.5 统计学分析 |
| 4 结果 |
| 4.1 各组大鼠血清心肌损伤标志物情况的变化 |
| 4.2 各组大鼠血清抗氧化酶的情况 |
| 4.3 各组大鼠血清和心肌中降钙素基因相关肽(CGRP)的含量变化 |
| 4.4 各组大鼠心肌组织中CGRP表达的情况 |
| 4.4.1 rACTb、CGRP的扩增曲线&溶解曲线 |
| 4.4.2 各组大鼠CGRP mRNA-α型的表达结果 |
| 4.4.3 各组大鼠心肌组织中CGRP-α型mRNA表达的定性分析结果 |
| 5 分析与讨论 |
| 5.1 6周递增负荷跑台训练对大鼠心肌酶活性、抗氧化酶和CGRP蛋白及基因的影响 |
| 5.1.1 6周递增负荷跑台训练对大鼠血清中心肌酶活性的影响 |
| 5.1.2 6周递增负荷跑台训练对大鼠血清中抗氧化酶活性的影响 |
| 5.1.3 6周递增负荷跑台训练对大鼠血清、心肌中降钙素基因相关肽(CGRP)蛋白及其基因的影响 |
| 5.2 补充复合中药对大鼠心肌酶活性、抗氧化酶和CGRP蛋白及基因的影响 |
| 5.2.1 补充复合中药对大鼠心肌酶活性的影响 |
| 5.2.2 补充复合中药对大鼠血清中抗氧化酶活性的影响 |
| 5.2.3 补充复合中药对大鼠血清、心肌中降钙素基因相关肽(CGRP)蛋白及其基因的影响 |
| 6 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 缩略词索引(ABBREVIATION) |
| 个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果 |
（8）降钙素基因相关肽基因导入对脑死亡大鼠的肺保护作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分：脑死亡大鼠CGRP表达变化与脑死亡肺损伤 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 统计学处理 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第二部分：外源性CGRP对脑死亡大鼠肺损伤的影响及其机制 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 统计学处理 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分：CGRP基因导入对脑死亡大鼠肺损伤的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 统计学处理 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 发表论文及科研情况 |
（9）低氧及跑台运动对大鼠内皮素和降钙素基因相关肽的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 大鼠低氧模型的建立 |
| 1.3 大鼠跑台训练模型的建立 |
| 1.4 实验指标的测定 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 低氧及跑台运动训练对大鼠体重、血压和心率的影响 |
| 2.2 低氧及跑台运动训练对大鼠ET的影响 |
| 2.3 低氧及跑台运动训练对大鼠CGRP的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 运动与内皮素 |
| 3.2 低氧与内皮素 |
| 3.3 运动与降钙素基因相关肽 |
| 3.4 低氧与降钙素基因相关肽 |
（10）肾上腺髓质素介导运动预适应心肌细胞保护作用及其机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 2 研究总体设计和技术路线 |
| 第一部分 运动预适应的心肌细胞保护作用与肾上腺髓质素研究进展 |
| 1 运动预适应的心肌细胞保护作用 |
| 1.1 细胞保护概述 |
| 1.2 缺血预适应与心肌细胞保护 |
| 1.3 运动预适应与心肌细胞保护 |
| 1.4 运动预适应研究中存在的问题和展望 |
| 2 肾上腺髓质素的研究进展 |
| 2.1 肾上腺髓质素的基因结构与表达调控 |
| 2.2 肾上腺髓质素的基因表达 |
| 2.3 肾上腺髓质素的来源 |
| 2.4 肾上腺髓质素受体 |
| 2.5 肾上腺髓质素的信号转导过程 |
| 2.6 肾上腺髓质素的生物学作用 |
| 2.7 肾上腺髓质素与运动 |
| 3 运动预适应与肾上腺髓质素 |
| 4 参考文献 |
| 第二部分 运动预适应诱导心肌细胞保护作用的研究 |
| 1 前言 |
| 2 实验对象与方法 |
| 2.1 技术路线 |
| 2.2 实验仪器与试剂 |
| 2.3 动物分组 |
| 2.4 运动预适应动物模型的建立 |
| 2.5 ISO 大鼠心肌缺血性损伤模型的制作 |
| 2.6 取材 |
| 2.7 实验方法 |
| 2.8 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 建模过程中大鼠状态的变化 |
| 3.2 建模过程中大鼠饮食量及体重的变化 |
| 3.3 大鼠血清 cTnI 的变化 |
| 3.4 大鼠心肌HE 染色变化 |
| 3.5 大鼠心肌HBFP 染色变化及计算机图像分析结果 |
| 3.6 大鼠心肌细胞超微结构的变化 |
| 4 分析与讨论 |
| 4.1 运动预适应动物模型的建立 |
| 4.2 运动预适应诱导的心肌细胞保护作用 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 第三部分 肾上腺髓质素介导运动预适应心肌细胞保护作用机制的研究 |
| 1 前言 |
| 2 实验对象与方法 |
| 2.1 技术路线 |
| 2.2 实验仪器与试剂 |
| 2.3 动物分组 |
| 2.4 动物模型的建立 |
| 2.5 实验方法 |
| 2.6 统计方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 大鼠血清ADM 含量的变化 |
| 3.2 心肌组织 ADM 含量的变化 |
| 3.3 心肌 ADM mRNA 表达的变化与计算机图像分析 |
| 3.4 心肌 ADM 免疫反应产物分布和表达的变化与计算机图像分析 |
| 4 讨论与分析 |
| 4.1 运动预适应对大鼠心肌细胞ADM m RNA 表达的影响 |
| 4.2 运动预适应对大鼠肾上腺髓质素的影响 |
| 4.3 肾上腺髓质素在运动预适应心肌细胞保护中的作用和机制 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 在读期间科研工作和发表论文情况 |
| 英文缩略词表 |
四、大鼠心肌顿抑时血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量的变化（论文参考文献）
- [1]基于mTORC1-ULK1-FUNDC1通路的电针预处理减轻MIRI的线粒体自噬机制研究[D]. 肖燕. 南京中医药大学, 2020(01)
- [2]大鼠心肌缺血再灌注损伤后脊髓代谢物变化 ——基于NMR的代谢组学分析[D]. 王乾. 华中科技大学, 2020(01)
- [3]运动预处理对老龄大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响[D]. 王雪. 黑龙江中医药大学, 2019(01)
- [4]三味檀香汤散对心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量影响的研究[J]. 李欣,郑玉云,杨玉梅. 陕西中医药大学学报, 2017(04)
- [5]有氧运动对心肌缺血作用及机制研究[D]. 王元会. 青岛大学, 2017(11)
- [6]降钙素基因相关肽对心肌顿抑的影响[J]. 李欣,郑玉云,杨玉梅. 陕西医学杂志, 2016(10)
- [7]补充复合中药对运动大鼠心肌损伤标志物及CGRP含量的影响[D]. 郑求烈. 北京体育大学, 2013(10)
- [8]降钙素基因相关肽基因导入对脑死亡大鼠的肺保护作用[D]. 孙振涛. 郑州大学, 2012(09)
- [9]低氧及跑台运动对大鼠内皮素和降钙素基因相关肽的影响[J]. 佟长青,赵娟,李海英,薄海. 中国康复医学杂志, 2010(06)
- [10]肾上腺髓质素介导运动预适应心肌细胞保护作用及其机制的研究[D]. 李宏伟. 上海体育学院, 2009(12)